Hur man mäter antalet levande celler i en cellfabrik

Wed May 18 13:36:38 CST 2022

En cell factory är en ettskikts- eller flerskiktsstruktur av cellodlingsförbrukningsvaror. Under cellodlingsprocessen måste vi förstå cellernas tillväxttillstånd i tid innan vi går vidare till nästa steg. Antalet livskraftiga celler kan detekteras genom trypanblåttfärgning. Den specifika driftmetoden är som följer:

1. För vidhäftande celler, aspirera mediet, tillsätt matsmältningslösningen och smält i inkubatorn under en lämplig tid. Efter att cellerna blivit runda, avslutades rötningen genom att tillsätta en lika stor eller större volym medium än rötgasvolymen. Efter centrifugering görs cellsuspensionen med odlingsmedium;

2. Ta 0,5 ml trypanblått lösning, 0,3 ml PBS och 0,2 ml cellsuspension och blanda väl. Sedan fick blandningen stå i 1-2 min. Använd en kapillärpipett eller en 10 ul liten pipettspets för att dra en liten mängd av blandningen och injicera den i hemocytometern;

3. Räkna minst 1000 celler och räkna antalet färgade celler;

4. Tvätta räkneplattan och täckglaset med ultrarent vatten och 75 % etanol;

5. Normala celler kommer inte att färgas, först efter att cellerna dör blir cellmembranets permeabilitet större, trypanblått kommer in i cellerna och cellerna ser blåa ut. Blandningen bör inte placeras för länge, annars kommer de normala levande cellerna också att ta upp färgämnet, vilket kommer att påverka räkningsnoggrannheten;

6. Cellviabilitet (%) = (totalt antal celler - antal färgade celler)/totalt antal celler*100;

7. Liksom cellräkningsmetoden har trypanblå färgning ett stort fel. Den kan bara upptäcka den tidiga apoptosnivån och kan inte visa skillnaden mellan kontrollgruppen och experimentgruppen.

I processen att odla celler i en cellfabrik finns det alltid några celler som dör av olika anledningar. Att bemästra antalet levande celler och cellviabilitet är en nyckeloperation i cellodlingsexperiment och ett effektivt sätt att säkerställa experimentets framsteg.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.