Fyra detektionsmetoder för mykoplasmakontamination i cellfabriker

Wed May 18 13:35:26 CST 2022

Mykoplasmakontamination är ett mycket vanligt problem när man odlar celler i cell factorys. Till skillnad från andra föroreningar blir mykoplasma-kontaminerade celler i allmänhet inte grumliga, så det är svårt att bedöma med blotta ögat. Det finns fyra sätt att avgöra om celler är kontaminerade med mykoplasma:

1. DNA-fluorescensfärgning

DNA-fluorescensfärgningsmetoden är baserad på principen att det fluorescerande färgämnet Hoechst33258 kan binda till den AT-basrika regionen i mykoplasmas DNA. Fluorescerande prickar är mykoplasma-DNA rikt på AT-basregioner.

2. PCR-teknologi

De specifika primrarna är designade enligt de konserverade sekvenserna i Mycoplasma-genomet, nukleinsyran i provet som ska testas amplifieras och diagnosen ställs genom att analysera storleken på den amplifierade produkten. PCR-detektionsteknologi används för att detektera mykoplasmakontamination, med kort cykel, hög känslighet, bra specificitet, enkel operation och kan detektera ett stort antal prover samtidigt.

3. Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA)

ELISA används för detektion av mykoplasmakontamination, med god specificitet och känslighet, och kan fullborda detektionen av ett stort antal prover samtidigt. Den har egenskaperna för enkel, snabb och kvantitativ kvalitativ detektering.

4. Elektronmikroskop

Generellt odlas celler i cellfabriker i 48 till 72 timmar. Innan cellerna är nästan sammanflytande, spjälkas cellerna med trypsin för att göra en cellsuspension, fixeras, bäddas in och skivas före observation.

Ovanstående är fyra vanliga detektionsmetoder vid detektering av mykoplasmakontamination i cellfabriker. För närvarande finns det mer än 20 typer av mykoplasma kända för att kontaminera celler, varav mer än 95% är oral mykoplasma, så operatörer bör vara uppmärksamma på aseptisk operation när de odlar celler.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.