Applicering av cellodlingsplatta i MTT-detektion

Wed May 18 13:33:32 CST 2022

Cellodlingsplattanär ett slags biologiskt verktyg. Den är uppdelad i platt botten och rund botten efter formen. Antalet brunnar inkluderar 6 brunnar, 12 brunnar, 24 brunnar, 48 ​​brunnar, 96 brunnar, 384 brunnar etc. Den används främst för cellodling och kan även användas för att mäta proteinkoncentration, 96-brunnars plattor används vanligtvis för MTT-detektion.

MTT-metoden, även känd som MTT-kolorimetrisk metod, är en metod för att detektera cellöverlevnad och tillväxt. Detektionsprincipen är att succinatdehydrogenaset i mitokondrierna hos levande celler kan reducera det exogena MTT till vattenolösligt blålila kristallformazan (Formazan) och deponera det i cellerna, medan döda celler inte har någon sådan funktion. Dimetylsulfoxid (DMSO) kan lösa formazan i celler, och dess ljusabsorptionsvärde mäts vid 570 nm med en enzymkopplad immunanalys, som indirekt kan återspegla antalet levande celler. Inom ett visst intervall av cellantal är mängden MTT-kristallbildning proportionell mot antalet celler. Detekteringsstegen är som följer:

1. Odla cellerna i en 96-brunnars cellodlingsplatta. Efter att celldensiteten är lämplig, tillsätt 50 ul MTT till varje brunn och fortsätt att odla i 4 timmar;

2. Sug bort odlingsmediet som innehåller MTT och tillsätt 150 ul DMSO. Vibrera horisontellt i 10 minuter för att helt lösa upp kristallerna. För suspenderade celler, efter centrifugering, sug bort  mediet och tillsätt sedan DMSO för att lösa upp;

3. Mät absorbansen vid 550 nm på det enzymkopplade immunoanalysinstrumentet (ställ in en rimlig kontrollgrupp och blank grupp);

4. Cellöverlevnadsgrad=absorbansvärde för experimentgrupp/absorbansvärde för kontrollgrupp*100%.

Det bör noteras under operationen att MTT är cancerframkallande. Om möjligt, försök att bära den typen av genomskinliga filmhandskar. Den förberedda MTT måste vara steril. MTT är mycket känsligt för bakterier. Det spelar ingen roll om du lägger till 96-brunnars cellodlingsplatta utan att skydda den från ljus. , Tiden är trots allt kort, eller så kan du stänga av belysningen på konsolen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.