Aktivitetsdetektering av celler i cellfabriker - MTT-metod

Wed May 18 13:33:01 CST 2022

är en förbrukningsvara som ofta används för adherent cellodling. Under experimentet måste vi förstå cellernas tillväxttillstånd i realtid och göra relevanta justeringar enligt den specifika situationen. Cellviabilitet kan detekteras med MTT-metoden för att bestämma celltillväxt.MTT-metoden, även känd som MTT-kolorimetrisk metod, är en metod för att detektera cellöverlevnad och tillväxt. Detektionsprincipen är att succinatdehydrogenas i mitokondrierna i levande celler kan reducera exogent MTT till vattenolösligt blålila kristallint formazan och deponeras i celler, medan döda celler inte har någon sådan funktion. Dimetylsulfoxid (DMSO) kan lösa formazan i celler, och dess ljusabsorptionsvärde kan mätas genom enzymkopplad immunosorbentanalys vid 570 nm våglängd, vilket indirekt kan återspegla antalet levande celler. Inom ett visst cellantalsområde är mängden MTT-kristallbildning proportionell mot cellantalet. Denna metod har använts i stor utsträckning vid aktivitetsdetektering av vissa biologiskt aktiva faktorer, storskalig antitumörläkemedelsscreening, cytotoxicitetstest och tumörradiosensitivitetsanalys. Den kännetecknas av hög känslighet och ekonomi.cell factory

Innan man testar cellernas livsduglighet i cellfabriken är ett mycket viktigt steg formuleringen av MTT. Vanligtvis är MTT-koncentrationen i denna metod 5 mg/ml. Därför kan 0,5 g MTT vägas, lösas i 100 ml fosfatbuffrad saltlösning (PBS) eller fenolrött medium, filtreras med ett 0,22 μm filter för att avlägsna bakterier i lösningen och förvaras vid 4°C i mörker . . Under förberedelse och förvaring, försök att slå in behållaren med aluminiumfolie.

När du använder MTT-metoden för att mäta cellaktiviteten i cellfabriken, bör det noteras att MTT är cancerframkallande, så var försiktig när du använder den. Denna metod kan endast användas för att detektera relativt cellantal och relativ viabilitet, men inte absolut cellantal. När du testar resultaten med en mikroplattläsare, för att säkerställa linjäriteten hos experimentresultaten, bör MTT-absorbansen vara i intervallet 0-0,7 så mycket som möjligt.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.