Kako prenesti kriokonzervirane celice v bučke za celične kulture

Wed May 18 13:21:08 CST 2022

Krioprezervacija celic je tehnika, ki celice postavi v okolje z nizko temperaturo, da se zmanjša celični metabolizem za dolgotrajno shranjevanje. Poleg zaščite celic se ta tehnologija pogosto uporablja za nakup, darilo, izmenjavo in transport določenih celic. Kako torej prenesemo kriokonzervirane celice v bučke za celično kulturo?

Zamrznjene celice je treba oživiti, preden lahko izvedemo naslednjo operacijo. Oživljanje celic mora biti hitro, da se lahko dobro ohrani sposobnost preživetja celic. Operacijo je mogoče izvesti na naslednji način:

1. Po prejemu celic preverite, ali je zunanja embalaža popolna; odprite zunanjo embalažo in vzemite celice, shranjene v suhem ledu;

2. Preverite, ali je epruveta za kriokonzerviranje poškodovana, ali je vsebina stopljena, in odstranjeno cev za krioprezervacijo hitro dajte v vodno kopel pri 37 ℃, da se stopi;

3. Cev za krioprezervacijo razkužimo s 75 % alkohola in postavimo v biološko varnostno omarico;

4. Dodajte 5 ml celotnega medija v 15 ml epruveto za centrifugiranje za uporabo;

5 Dodajte celično suspenzijo v epruveti za krioprezervacijo v pripravljeno gojišče in nežno premešajte;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. 15-mL centrifugalno epruveto vstavite v centrifugo in centrifugirajte pri 1000 vrt/min (približno 200 g) 3-5 minut;

7. Dodajte 5 ml celotnega medija v 25 ml bučko za celično kulturo za uporabo;

8. Vzemite centrifugirane celice, jih sterilizirajte z alkoholom in jih postavite v varno omaro;

9. Centrifugirani celični supernatant nežno aspirirajte, dodajte 1 ml celotnega medija, da celice resuspendirate;

10. Resuspendirane celice dodajte v pripravljeno bučko celične kulture in nežno premešajte;

11. Opazujte stanje in gostoto inokuliranih celic pod mikroskopom in bučko postavite v inkubator pri 37 °C za kulturo.

V procesu obnavljanja celic lahko hitro zlitje zagotovi, da se zunajcelični kristali stopijo v kratkem času časa in preprečiti poškodbe celic zaradi počasnega taljenja, zaradi katerega voda prodre v celice in tvori znotrajcelično prekristalizacijo. bučke za celično kulturo in drugi uporabljeni potrošni materiali morajo biti aseptični.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.