Štiri metode odkrivanja kontaminacije z mikoplazmo v celičnih tovarnah

Wed May 18 13:19:41 CST 2022

Kontaminacija z mikoplazmo je zelo pogosta težava pri gojenju celic v cell factories. Za razliko od drugih kontaminacij celice, okužene z mikoplazmo, praviloma ne postanejo motne, zato jih je težko oceniti s prostim očesom. Obstajajo štirje načini za ugotavljanje, ali so celice kontaminirane z mikoplazmo:

1. Fluorescenčno obarvanje DNK

Fluorescenčno obarvanje DNK temelji na načelu, da se lahko fluorescenčno barvilo Hoechst33258 veže na regijo, bogato z AT bazo, v DNK mikoplazme. Fluorescentne pike so DNK mikoplazme, bogata z AT baznimi regijami.

2. Tehnologija PCR

Specifični primerji so zasnovani v skladu z ohranjenimi sekvencami v genomu Mycoplasma, nukleinska kislina vzorca, ki ga je treba testirati, je pomnožena, diagnoza pa se postavi z analizo velikosti pomnoženega produkta. Tehnologija za odkrivanje PCR se uporablja za odkrivanje kontaminacije z mikoplazmo, s kratkim ciklom, visoko občutljivostjo, dobro specifičnostjo, preprostim delovanjem in lahko zazna veliko število vzorcev naenkrat.

3. Encimsko vezan imunski test (ELISA)

ELISA se uporablja pri odkrivanju kontaminacije z mikoplazmo z dobro specifičnostjo in občutljivostjo ter lahko dokonča odkrivanje velikega števila vzorcev hkrati. Ima značilnosti preprostega, hitrega in kvantitativnega kvalitativnega odkrivanja.

4. Elektronski mikroskop

Na splošno se celice v celičnih tovarnah gojijo 48 do 72 ur. Preden so celice skoraj konfluentne, se celice prebavijo s tripsinom, da se naredi celična suspenzija, fiksira, vgradi in razreže pred opazovanjem.

Zgoraj so štiri pogosto uporabljene metode odkrivanja pri odkrivanju kontaminacije z mikoplazmo v celičnih tovarnah. Trenutno obstaja več kot 20 vrst mikoplazme, za katere je znano, da kontaminirajo celice, od tega je več kot 95 % oralnih mikoplazm, zato morajo operaterji pri gojenju celic biti pozorni na aseptično delovanje.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.