Uporaba plošče celične kulture pri detekciji MTT

Wed May 18 13:17:44 CST 2022

plošča za celično kulturoje neke vrste biološko orodje. Glede na obliko se deli na ravno dno in okroglo dno. Število vdolbinic vključuje 6 vdolbinic, 12 vdolbinic, 24 vdolbinic, 48 ​​vdolbine, 96 vdolbinic, 384 vdolbinic itd. Uporablja se predvsem za celično kulturo in se lahko uporablja tudi za merjenje koncentracijo beljakovin, plošče s 96 vdolbinicami se običajno uporabljajo za odkrivanje MTT.

MTT metoda, znana tudi kot kolorimetrična metoda MTT, je metoda za odkrivanje preživetja in rasti celic. Načelo detekcije je, da lahko sukcinat dehidrogenaza v mitohondrijih živih celic reducira eksogeni MTT v vodonetopen modro-vijolični kristalni formazan (Formazan) in ga odloži v celicah, medtem ko mrtve celice nimajo te funkcije. Dimetil sulfoksid (DMSO) lahko raztopi formazan v celicah, njegova vrednost absorpcije svetlobe pa se meri pri 570 nm z encimsko vezanim imunskim testom, ki lahko posredno odraža število živih celic. V določenem razponu številk celic je količina tvorbe kristalov MTT sorazmerna s številom celic. Koraki odkrivanja so naslednji:

1. Kulturirajte celice v 96-jamska plošča za celično kulturo. Ko je gostota celic ustrezna, dodajte 50 ul MTT v vsako vdolbino in nadaljujte s kulturo 4 ure;

2. Odsesajte gojišče, ki vsebuje MTT, in dodajte 150 ul DMSO. Vibrirajte vodoravno 10 minut, da se kristali popolnoma raztopijo. Za suspendirane celice po centrifugiranju odsesajte medij in nato dodajte DMSO, da se raztopi;

3. Izmerite absorbanco pri 550 nm na instrumentu za encimsko imunotestiranje (nastavite razumno kontrolno skupino in slepo skupino);

4. Stopnja preživetja celic=vrednost absorpcije poskusne skupine/vrednost absorpcije kontrolne skupine*100%.

Med operacijo je treba opozoriti, da je MTT kancerogen. Če je mogoče, poskusite nositi rokavice iz prozornega filma. Pripravljeni MTT mora biti sterilen. MTT je zelo občutljiv na bakterije. Ni pomembno, če dodate ploščo za celično kulturo s 96 vdolbinicami, ne da bi jo zaščitili pred svetlobo. , Konec koncev je časa malo ali pa lahko izklopite osvetlitev na konzoli.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.