Detekcija aktivnosti celic v celičnih tovarnah - MTT metoda

Wed May 18 13:17:13 CST 2022

je potrošni material, ki se pogosto uporablja za adherentno celično kulturo. Med poskusom moramo v realnem času dojeti rastno stanje celic in izvesti ustrezne prilagoditve glede na specifično situacijo. Viabilnost celic je mogoče zaznati z metodo MTT za določitev rasti celic.MTT metoda, znana tudi kot kolorimetrična metoda MTT, je metoda za odkrivanje preživetja in rasti celic. Načelo odkrivanja je, da lahko sukcinat dehidrogenaza v mitohondrijih živih celic reducira eksogeni MTT v vodonetopen modro-vijolični kristalni formazan in se odloži v celicah, medtem ko mrtve celice nimajo takšne funkcije. Dimetil sulfoksid (DMSO) lahko raztopi formazan v celicah, njegovo vrednost absorpcije svetlobe pa lahko izmerimo z encimsko vezanim imunosorbentnim testom pri valovni dolžini 570 nm, ki lahko posredno odraža število živih celic. V določenem območju števila celic je količina tvorbe kristalov MTT sorazmerna s številom celic. Ta metoda je bila široko uporabljena pri odkrivanju aktivnosti nekaterih biološko aktivnih dejavnikov, obsežnem presejanju protitumorskih zdravil, testu citotoksičnosti in testu radiosenzitivnosti tumorja. Zanj je značilna visoka občutljivost in ekonomičnost.cell factory

Pred testiranjem sposobnosti preživetja celic v celični tovarni je zelo pomemben korak formulacija MTT. Običajno je koncentracija MTT pri tej metodi 5 mg/ml. Zato lahko 0,5 g MTT stehtamo, raztopimo v 100 ml fiziološke raztopine s fosfatnim pufrom (PBS) ali medija brez rdečega fenola, filtriramo s filtrom 0,22 μm, da odstranimo bakterije v raztopini, in shranimo pri 4 °C v temi. . . Med pripravo in shranjevanjem poskušajte posodo zaviti z aluminijasto folijo.

Pri meritvi celične aktivnosti v celični tovarni po metodi MTT je treba upoštevati, da je MTT rakotvoren, zato bodite previdni pri uporabi. Ta metoda se lahko uporablja samo za odkrivanje relativnega števila celic in relativne sposobnosti preživetja, ne pa tudi absolutnega števila celic. Pri testiranju rezultatov s čitalnikom mikroploščic, da bi zagotovili linearnost eksperimentalnih rezultatov, mora biti MTT absorbanca čim več v območju 0-0,7.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.