Testarea de citotoxicitate a fabricilor de celule

Wed May 18 12:47:16 CST 2022

Citotoxicitatea este un eveniment pur de ucidere a celulelor cauzat de celule sau substanțe chimice care nu se bazează pe apoptoză sau necroză ca mecanism de moarte celulară. Prin acest test, se poate aprecia dacă materiile prime ale cell factory conțin substanțe care nu sunt propice creșterii celulare.

Citotoxicitatea este efectul substanțelor chimice (medicamente) asupra structurii de bază și /sau proces fiziologic al celulelor, cum ar fi membrana celulară sau structura citoscheletului, procesul de metabolism celular, sinteza, degradarea sau eliberarea componentelor sau a produselor celulare, reglarea ionilor și diviziunea celulară și alte procese, care conduc la tulburări de supraviețuire, proliferare și/sau celule. funcția, rezultând reacții adverse. În general, testarea dacă o fabrică de celule este citotoxică se poate face prin următoarele metode:

1. Metode MTT și XTT: folosind activitatea enzimelor din interiorul mitocondriilor, sărurile specifice de tetrazoliu pot fi convertite și apoi detectate de un cititor de microplăci;

2. Metoda LDH: citotoxicitatea este detectată prin detectarea activității enzimatice a LDH în supernatantul culturii celulare;

3. Alte metode enzimatice: cum ar fi detectarea activităților fosfatazei alcaline și fosfatazei acide în supernatant;

4. Kit de analiză a proliferării celulare: Celulele normale au un metabolism viguros, iar succinat dehidrogenaza din mitocondriile lor poate reduce sărurile de tetrazoliu (cum ar fi MTT, XTT, WST-1 etc.) la substanțe cristaline violet, depuse în jurul celulelor și apoi citiți OD valoare de către un cititor de microplăci pentru a detecta starea de proliferare celulară.

5. Detectarea viabilității celulare prin metoda luminiscenței fluoresceinei: Adenilat kinaza (AK) există în citoplasma tuturor celulelor eucariote și procariote, iar AK poate activa ADP pentru a genera ATP. Când celulele sunt deteriorate, membrana celulară este deteriorată și AK este eliberat în supernatantul culturii. Trusa folosește luciferaza și luciferina pentru a emite lumină sub acțiunea ATP și poate fi detectată cantitativ cu un instrument de chemiluminiscență.

Testarea dacă o fabrică de celule are citotoxicitate poate fi efectuată în mai multe moduri, iar acest test este, de asemenea, unul dintre elementele de testare de rutină pentru a asigura calitatea consumabilelor de cultură celulară.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.