Detectarea activității celulelor în fabricile de celule - metoda MTT

Wed May 18 12:45:42 CST 2022

este un consumabil care este adesea folosit pentru cultura celulară aderentă. În timpul experimentului, trebuie să înțelegem starea de creștere a celulelor în timp real și să facem ajustări relevante în funcție de situația specifică. Viabilitatea celulară poate fi detectată prin metoda MTT pentru a determina creșterea celulelor.Metoda MTT, cunoscută și ca metoda colorimetrică MTT, este o metodă pentru detectarea supraviețuirii și creșterii celulelor. Principiul de detectare este că succinatul dehidrogenaza din mitocondriile celulelor vii poate reduce MTT exogen la formazan cristalin albastru-violet insolubil în apă și poate depune în celule, în timp ce celulele moarte nu au o astfel de funcție. Dimetilsulfoxidul (DMSO) poate dizolva formazanul în celule, iar valoarea sa de absorbție a luminii poate fi măsurată prin test imunosorbant legat de enzime la o lungime de undă de 570 nm, care poate reflecta indirect numărul de celule vii. Într-un anumit interval de număr de celule, cantitatea de formare de cristale MTT este proporțională cu numărul de celule. Această metodă a fost utilizată pe scară largă în detectarea activității unor factori biologic activi, screening-ul pe scară largă a medicamentelor antitumorale, testul de citotoxicitate și testul de radiosensibilitate tumorală. Se caracterizează prin sensibilitate ridicată și economie.cell factory

Înainte de a testa viabilitatea celulelor în fabrica de celule, un pas foarte important este formularea MTT. De obicei, concentrația MTT în această metodă este de 5 mg/ml. Prin urmare, 0,5 g de MTT pot fi cântărite, dizolvate în 100 ml de soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) sau mediu fără roșu fenol, filtrate cu un filtru de 0,22 μm pentru a îndepărta bacteriile din soluție și depozitate la 4°C în întuneric. . . În timpul pregătirii și depozitării, încercați să împachetați recipientul cu folie de aluminiu.

Când utilizați metoda MTT pentru măsurarea activității celulelor în fabrica de celule, trebuie reținut că MTT este cancerigen, așa că aveți grijă când îl utilizați. Această metodă poate fi utilizată numai pentru a detecta numărul relativ de celule și viabilitatea relativă, dar nu și numărul absolut de celule. La testarea rezultatelor cu un cititor de microplăci, pentru a asigura liniaritatea rezultatelor experimentale, absorbanța MTT trebuie să fie în intervalul 0-0,7 cât mai mult posibil.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.