Etapas específicas para o cultivo de células de rim de hamster em frascos de cultura de células

Thu May 19 09:46:33 CST 2022

Ao cultivar várias células, frascos de cultura de células é um tipo de consumível de cultura de células que é usado com mais frequência. São utilizados principalmente para o cultivo de células aderentes, e as especificações variam de 25ml a 225ml. O meio de cultura de células de rim de hamster usará este consumível, e as etapas específicas de sua cultura são as seguintes:

1. Trabalho preparatório para cultura de células:

1) Preparar meio MEM; soro fetal bovino de alta qualidade, 10%; anticorpo duplo 1%.

2) Condições de cultura: Fase gasosa: ar, 95%; dióxido de carbono, 5%. Temperatura: 37 graus Celsius, umidade da incubadora de 70%-80%.

3) Solução de congelamento: 90% soro, 10% DMSO, pronto para uso.

2. Processamento celular:

1) Recuperação de células criopreservadas: Agite e descongele rapidamente o tubo criopreservado contendo 1 mL de suspensão de células em banho-maria a 37°C, adicione-o a um tubo de centrífuga contendo 4-6 mL de meio completo e misture Nós vamos. Centrifugar a 1000RPM por 3-5min, descartar o sobrenadante e ressuspender as células em meio completo. A suspensão de células foi então adicionada a um frasco de cultura de células contendo 6-8 ml de meio completo e cultivada a 37°C durante a noite. O crescimento celular e a densidade celular foram observados ao microscópio no dia seguinte.

2) Passagem celular: Se a densidade celular atingir 80%-90%, pode ser subcultivada.

3) Criopreservação de células: Após receber o células, recomenda-se congelar um lote de sementes de células nas primeiras 3 passagens de cultura para experiências subsequentes.

Os passos acima são específicos para a cultura de células de rim de hamster em frascos de cultura de células. Além disso, quando as células são criopreservadas, colete as células digeridas em um tubo de centrífuga de acordo com o processo de passagem das células e use um hemocitômetro para contá-las para determinar a densidade de criopreservação das células. A densidade de congelamento recomendada de células gerais é de 1×106~1×107 células viáveis/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.