Como medir o número de células vivas em uma fábrica de células

Thu May 19 09:44:56 CST 2022

Um cell factory é uma estrutura de uma ou várias camadas de consumíveis de cultura de células. Durante o processo de cultura de células, precisamos entender o estado de crescimento das células a tempo antes de prosseguir para a próxima etapa. O número de células viáveis ​​pode ser detectado por coloração com azul de tripano. O método de operação específico é o seguinte:

1. Para células aderentes, aspirar o meio, adicionar a solução de digestão e digerir na incubadora por um tempo apropriado. Após as células ficarem redondas, a digestão foi terminada pela adição de um volume de meio igual ou superior ao volume do digerido. Após centrifugação, a suspensão de células é feita com meio de cultura;

2. Tome 0,5 ml de solução de azul de tripano, 0,3 ml de PBS e 0,2 ml de suspensão de células e misture bem. Em seguida, a mistura foi deixada por 1-2 min. Use uma pipeta capilar ou uma ponta de pipeta pequena de 10ul para extrair uma pequena quantidade da mistura e injetá-la no hemocitômetro;

3. Conte pelo menos 1000 células e conte o número de células coradas;

4. Lave a placa de contagem e lamínula com água ultrapura e etanol 75%;

5. As células normais não serão coradas, somente depois que as células morrerem, a permeabilidade da membrana celular se tornará maior, o azul de tripano entrar nas células e as células parecerão azuis. A mistura não deve ser colocada por muito tempo, caso contrário as células vivas normais também absorverão o corante, o que afetará a precisão da contagem;

6. Viabilidade celular (%) = (número total de células - número de células coradas)/número total de células*100;

7. Assim como o método de contagem de células, a coloração com azul de tripano apresenta um grande erro. Ele só pode detectar o nível de apoptose precoce, e não pode mostrar a diferença entre o grupo de controle e o grupo experimental.

No processo de cultivo de células em uma fábrica de células, sempre há algumas células que morrem devido a vários motivos. Dominar o número de células vivas e a viabilidade celular é uma operação fundamental em experimentos de cultura de células e uma maneira eficaz de garantir o progresso do experimento.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.