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A contaminação por micoplasma é um problema muito comum ao cultivar células em cell factory. Ao contrário de outras contaminações, as células contaminadas por micoplasma geralmente não ficam turvas, por isso é difícil avaliar a olho nu. Existem quatro maneiras de determinar se as células estão contaminadas com micoplasma:
1. Coloração por fluorescência de DNA
O método de coloração por fluorescência de DNA é baseado no princípio de que o corante fluorescente Hoechst33258 pode se ligar à região rica em bases AT no DNA do micoplasma. Os pontos fluorescentes são DNA de micoplasma rico em regiões de base AT.
2. Tecnologia PCR
Os primers específicos são desenhados de acordo com as sequências conservadas no genoma do Mycoplasma, o ácido nucleico da amostra a ser testada é amplificado e o diagnóstico é feito analisando o tamanho do produto amplificado. A tecnologia de detecção de PCR é usada para a detecção de contaminação por micoplasma, com ciclo curto, alta sensibilidade, boa especificidade, operação simples e pode detectar um grande número de amostras ao mesmo tempo.
3. O ensaio imunoenzimático (ELISA)
ELISA é utilizado na detecção de contaminação por micoplasma, com boa especificidade e sensibilidade, podendo completar a detecção de um grande número de amostras de uma só vez. Tem as características de detecção qualitativa simples, rápida e quantitativa.
4. Microscópio eletrônico
Geralmente, as células em fábricas de células são cultivadas por 48 a 72 horas. Antes que as células estejam quase confluentes, as células são digeridas com tripsina para fazer uma suspensão de células, fixadas, incorporadas e cortadas antes da observação.
Os acima são quatro métodos de detecção comumente usados ao detectar contaminação por micoplasma em fábricas de células. Atualmente, existem mais de 20 tipos de micoplasma conhecidos por contaminar células, dos quais mais de 95% são micoplasma oral, portanto, os operadores devem prestar atenção à operação asséptica ao cultivar células.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.