Testes de citotoxicidade de fábricas de células

Thu May 19 09:43:13 CST 2022

A citotoxicidade é um evento puramente de morte celular causado por células ou produtos químicos que não dependem de apoptose ou necrose como mecanismo de morte celular. Através deste teste, pode-se avaliar se as matérias-primas do cell factory contêm substâncias que não favorecem o crescimento celular.

Citotoxicidade é o efeito de substâncias químicas (drogas) na estrutura básica e /ou processo fisiológico das células, como membrana celular ou estrutura do citoesqueleto, processo de metabolismo celular, síntese, degradação ou liberação de componentes ou produtos celulares, regulação de íons e divisão celular e outros processos, levando a distúrbios de sobrevivência, proliferação e/ou função, resultando em reações adversas. Geralmente, testar se uma fábrica de células é citotóxica pode ser feito pelos seguintes métodos:

1. Métodos MTT e XTT: usando a atividade de enzimas dentro da mitocôndria, sais de tetrazólio específicos podem ser convertidos e detectados por um leitor de microplacas;

2. Método LDH: a citotoxicidade é detectada pela detecção da actividade enzimática de LDH no sobrenadante da cultura celular; Outros métodos enzimáticos: como detectar as atividades da fosfatase alcalina e fosfatase ácida no sobrenadante;

4. Kit de análise de proliferação celular: as células normais têm metabolismo vigoroso, e a succinato desidrogenase em suas mitocôndrias pode reduzir os sais de tetrazólio (como MTT, XTT, WST-1, etc.) valor por um leitor de microplacas para detectar o estado de proliferação celular.

5. Detecção da viabilidade celular pelo método de luminescência de fluoresceína: A adenilato quinase (AK) existe no citoplasma de todas as células eucarióticas e procarióticas, e a AK pode ativar o ADP para gerar ATP. Quando as células são danificadas, a membrana celular é danificada e o AK é liberado no sobrenadante da cultura. O kit usa luciferase e luciferina para emitir luz sob a ação do ATP e pode ser detectado quantitativamente por um instrumento de quimioluminescência.

Testar se uma fábrica de células tem citotoxicidade pode ser realizado de várias maneiras, e este teste também é um dos os itens de teste de rotina para garantir a qualidade dos consumíveis de cultura de células.

Testing whether a cell factory has cytotoxicity can be carried out in several ways, and this test is also one of the routine testing items to ensure the quality of cell culture consumables.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.