Konkretne etapy hodowli komórek nerki chomika w kolbach do hodowli komórkowych

Wed May 18 12:37:04 CST 2022

Podczas hodowli różnych komórek, kolby do hodowli komórek są rodzajem materiałów zużywalnych do hodowli komórkowych, które są częściej używane. Są one najczęściej używane do hodowli komórek adherentnych, a specyfikacje wahają się od 25 ml do 225 ml. Pożywka do hodowli komórek nerki chomika będzie wykorzystywać ten materiał zużywalny, a konkretne etapy jej hodowli są następujące:

1. Prace przygotowawcze do hodowli komórek:

1) Przygotuj pożywkę MEM; wysokiej jakości płodowa surowica bydlęca 10%; podwójne przeciwciało 1%.

2) Warunki hodowli: Faza gazowa: powietrze, 95%; dwutlenek węgla, 5%. Temperatura: 37 stopni Celsjusza, wilgotność inkubatora 70%-80%.

3) Roztwór zamrażający: 90% surowica, 10% DMSO, gotowy do użycia.

2. Obróbka komórek:

1) Odzyskiwanie zamrożonych komórek: Szybko wstrząśnij i rozmroź zamrożoną probówkę zawierającą 1 ml zawiesiny komórek w łaźni wodnej o temperaturze 37°C, dodaj ją do probówki wirówkowej zawierającej 4-6 ml kompletnej pożywki i wymieszaj dobrze. Wirować przy 1000 obr./min przez 3-5 min, odrzucić supernatant i ponownie zawiesić komórki w pełnej pożywce. Zawiesinę komórek następnie dodano do kolby do hodowli komórek zawierającej 6-8 ml kompletnej pożywki i hodowano w 37°C przez noc. Wzrost komórek i gęstość komórek obserwowano następnego dnia pod mikroskopem.

2) Pasaż komórek: Jeśli gęstość komórek osiąga 80%-90%, można je przesiać.

3) Kriokonserwacja komórek: Po otrzymaniu komórek, zaleca się zamrożenie partii nasion komórek w pierwszych 3 pasażach hodowli do kolejnych eksperymentów.

Powyższe są specyficzne etapy hodowli komórek nerki chomika w butelkach do hodowli komórkowych. Ponadto, gdy komórki są kriokonserwowane, zbierz trawione komórki do probówki wirówkowej zgodnie z procesem pasażu komórek i użyj hemocytometru do ich zliczenia w celu określenia gęstości kriokonserwacji komórek. Zalecana gęstość zamrażania ogólnych komórek wynosi 1×106~1×107 żywych komórek/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.