Jak przenieść kriokonserwowane komórki do kolb do hodowli komórkowych?

Wed May 18 12:36:00 CST 2022

Kriokonserwacja komórek to technika polegająca na umieszczaniu komórek w środowisku o niskiej temperaturze w celu zmniejszenia metabolizmu komórkowego w celu długotrwałego przechowywania. Oprócz ochrony komórek technologia ta jest często wykorzystywana do kupowania, prezentowania, wymiany i transportu niektórych komórek. Jak więc przenieść zamrożone komórki do kolb do hodowli komórek?

Zamrożone komórki muszą być resuscytowane przed przeprowadzeniem następnej operacji. Resuscytacja komórek powinna być szybka, aby można było dobrze zachować żywotność komórek. Operację można przeprowadzić w następujący sposób:

1. Po otrzymaniu ogniw sprawdź, czy opakowanie zewnętrzne jest kompletne; otworzyć opakowanie zewnętrzne i wyjąć ogniwa przechowywane w suchym lodzie;

2. Sprawdź, czy probówka do kriokonserwacji jest uszkodzona, czy zawartość jest stopiona i szybko włóż wyjętą probówkę do kriokonserwacji do łaźni wodnej o temperaturze 37 ℃, aby się stopiła;

3. Rurka do kriokonserwacji jest dezynfekowana 75% alkoholem i umieszczana w komorze bezpieczeństwa biologicznego;

4. Dodać 5 ml kompletnej pożywki do probówki wirówkowej o pojemności 15 ml;

5 Dodać zawiesinę komórek w probówce do kriokonserwacji do przygotowanej pożywki i delikatnie wymieszać;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. Umieścić probówkę wirówkową 15mL w wirówce i wirować przy 1000rpm/min (około 200g) przez 3-5min;

7. Dodać 5 ml kompletnej pożywki do 25 ml kolby do hodowli komórkowej;

8. Wyjmij odwirowane komórki, wysterylizuj je alkoholem i umieść w bezpiecznej szafce;

9. Delikatnie zaaspirować odwirowany supernatant komórkowy, dodać 1 ml kompletnej pożywki, aby ponownie zawiesić komórki;

10. Dodać zawieszone komórki do przygotowanej kolby do hodowli komórkowej i delikatnie wymieszać;

11. Obserwuj stan i gęstość inokulowanych komórek pod mikroskopem i umieść kolbę hodowlaną w inkubatorze o temperaturze 37°C do hodowli.

W procesie odzyskiwania komórek, szybka fuzja może zapewnić, że kryształy zewnątrzkomórkowe roztopią się w krótkim czasie czasu i uniknąć uszkodzenia komórek z powodu powolnego topnienia, które powoduje penetrację wody do komórek, tworząc rekrystalizację wewnątrzkomórkową. kolby do hodowli komórkowych i inne używane materiały eksploatacyjne powinny być aseptyczne.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.