Jak zmierzyć liczbę żywych komórek w fabryce komórek?

Wed May 18 12:35:51 CST 2022

to jednowarstwowa lub wielowarstwowa struktura materiałów eksploatacyjnych do hodowli komórkowych. Podczas procesu hodowli komórek musimy w porę uchwycić stan wzrostu komórek, zanim przejdziemy do następnego kroku. Liczbę żywych komórek można wykryć za pomocą barwienia błękitem trypanu. Konkretna metoda działania jest następująca:1. W przypadku komórek przylegających odessać pożywkę, dodać roztwór trawiący i trawić w inkubatorze przez odpowiedni czas. Po tym, jak komórki stały się okrągłe, trawienie zakończono przez dodanie równej lub większej objętości pożywki niż objętość pofermentu. Po odwirowaniu zawiesinę komórek sporządza się w pożywce hodowlanej;fabryka ogniw

2. Weź 0,5 ml roztworu błękitu trypanu, 0,3 ml PBS i 0,2 ml zawiesiny komórek i dobrze wymieszaj. Następnie mieszaninę pozostawiono na 1-2 min. Za pomocą pipety kapilarnej lub małej końcówki do pipety o pojemności 10 μl pobrać niewielką ilość mieszaniny i wstrzyknąć ją do hemocytometru;

3. Policzyć co najmniej 1000 komórek i policzyć liczbę wybarwionych komórek;

4. Przemyć płytkę do zliczania i szkiełko nakrywkowe ultraczystą wodą i 75% etanolem;

5. Prawidłowe komórki nie zostaną zabarwione, dopiero po obumarciach komórek przepuszczalność błony komórkowej staje się większa, błękit trypanu wnika do komórek, a komórki wydają się niebieskie. Mieszanki nie należy umieszczać zbyt długo, w przeciwnym razie normalne żywe komórki również wchłoną barwnik, co wpłynie na dokładność liczenia;

6. Żywotność komórek (%) = (całkowita liczba komórek - liczba wybarwionych komórek)/całkowita liczba komórek*100;

7. Podobnie jak metoda liczenia komórek, barwienie błękitem trypanu ma duży błąd. Może jedynie wykryć wczesny poziom apoptozy i nie może pokazać różnicy między grupą kontrolną a grupą eksperymentalną.

W procesie hodowli komórek w fabryce komórek, zawsze są jakieś komórki, które umierają z różnych powodów. Opanowanie liczby żywych komórek i żywotności komórek jest kluczową operacją w eksperymentach z hodowlą komórkową i skutecznym sposobem zapewnienia postępu eksperymentu.

In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.