Produkcja wirusa zapalenia wątroby typu C o wysokim mianie w skalowalnym jednorazowym bioreaktorze o wysokiej gęstości komórek

Wed May 18 12:35:07 CST 2022

2. Materiały i metody

2.1. Utrzymanie komórek Huh7.5

Huh7.5 hodowle utrzymywano w Kolby T do hodowli komórkowej w pożywce zawierającej surowicę (SCM): Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) (Gibco, Paisley, UK) zawierającej 4 mM GlutaMAX i uzupełnione 10% płodowa surowica bydlęca (Sigma, St. Louis, MO, USA), 100 U/ml penicyliny i 100 µg/ml streptomycyny (Sigma). W kolbach T175 (Nunc, Roskilde, Dania) i kolbach do hodowli trójwarstwowych (Nunc), komórki Huh7.5 pasażowano co 2-3 dni. Wszystkie hodowle komórkowe utrzymywano w 37°C i 5% CO2.

2.2. Zapasy wirusa HCV

Dwa potwierdzone sekwencyjnie zapasy rekombinowanego SA13/JFH1core-NS5B genotypu 5a [28], hodowane w jednowarstwowych hodowlach komórek Huh7.5 w butelkach T, zastosowano w tym badaniu. Do zaszczepienia hodowli CelCradle™, wytrząsania hodowli w kolbach i do eksperymentów dotyczących charakterystyki wirusa zastosowano trzeci pasażowany zapas wirusa o mianie zakaźności 5,8 log10 FFU/ml, hodowany w warunkach zawierających surowicę (SC) [39]. Do eksperymentów charakteryzowania wirusa użyto szczepu wirusa z czwartego pasażu o mianu zakaźności 5,1 log10 FFU/ml [32], hodowanego w warunkach SF [39].

Źródło z: https://www.mdpi .com/2076-393X/10/2/249/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.