Cztery metody wykrywania skażenia mykoplazmą w fabrykach komórek

Wed May 18 12:35:00 CST 2022

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest bardzo częstym problemem podczas hodowli komórek w fabryki komórek. W przeciwieństwie do innych zanieczyszczeń, komórki skażone mykoplazmą na ogół nie mętnieją, więc trudno jest ocenić go gołym okiem. Istnieją cztery sposoby określenia, czy komórki są skażone mykoplazmą:

1. Barwienie fluorescencyjne DNA

Metoda barwienia fluorescencyjnego DNA opiera się na zasadzie, że barwnik fluorescencyjny Hoechst33258 może wiązać się z regionem bogatym w zasady AT w DNA mykoplazmy. Kropki fluorescencyjne są mykoplazmowym DNA bogatym w regiony zasad AT.

2. Technologia PCR

Swoiste startery projektuje się zgodnie z konserwatywnymi sekwencjami w genomie Mycoplasma, amplifikuje się kwas nukleinowy testowanej próbki, a diagnozę stawia się poprzez analizę wielkości amplifikowanego produktu. Technologia wykrywania PCR służy do wykrywania zanieczyszczenia mykoplazmą, z krótkim cyklem, wysoką czułością, dobrą specyficznością, prostą obsługą i może wykryć dużą liczbę próbek jednocześnie.

3. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

ELISA jest używany do wykrywania zanieczyszczenia mykoplazmą, z dobrą specyficznością i czułością i może zakończyć wykrywanie dużej liczby próbek jednocześnie. Posiada cechy prostego, szybkiego i ilościowego wykrywania jakościowego.

4. Mikroskop elektronowy

Na ogół komórki w fabrykach komórek hoduje się przez 48 do 72 godzin. Zanim komórki osiągną prawie konfluencję, komórki trawi się trypsyną w celu wytworzenia zawiesiny komórkowej, utrwala, zatapia i kroi przed obserwacją.

Powyższe są cztery powszechnie stosowane metody wykrywania przy wykrywaniu zanieczyszczenia mykoplazmą w fabrykach komórek. Obecnie istnieje ponad 20 rodzajów mykoplazm, o których wiadomo, że zanieczyszczają komórki, z czego ponad 95% to mykoplazmy jamy ustnej, więc operatorzy powinni zwracać uwagę na aseptyczne działanie podczas hodowli komórek.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.