Wykrywanie aktywności komórek w fabrykach komórek - metoda MTT

Wed May 18 12:33:16 CST 2022

jest materiałem zużywalnym, który jest często używany do hodowli komórek adherentnych. Podczas eksperymentu musimy uchwycić stan wzrostu komórek w czasie rzeczywistym i dokonać odpowiednich korekt w zależności od konkretnej sytuacji. Żywotność komórek można wykryć metodą MTT w celu określenia wzrostu komórek.Metoda MTT, znana również jako metoda kolorymetryczna MTT, jest metodą wykrywania przeżycia i wzrostu komórek. Zasada wykrywania jest taka, że ​​dehydrogenaza bursztynianowa w mitochondriach żywych komórek może redukować egzogenny MTT do nierozpuszczalnego w wodzie niebiesko-fioletowego krystalicznego formazanu i odkładać się w komórkach, podczas gdy martwe komórki nie mają takiej funkcji. Dimetylosulfotlenek (DMSO) może rozpuszczać formazan w komórkach, a jego wartość absorpcji światła można zmierzyć za pomocą testu immunoenzymatycznego przy długości fali 570 nm, który może pośrednio odzwierciedlać liczbę żywych komórek. W pewnym zakresie liczby komórek ilość formowanych kryształów MTT jest proporcjonalna do liczby komórek. Metoda ta jest szeroko stosowana w wykrywaniu aktywności niektórych czynników biologicznie czynnych, wielkoskalowych badaniach przesiewowych leków przeciwnowotworowych, testach cytotoksyczności i testach radiowrażliwości nowotworu. Charakteryzuje się wysoką czułością i oszczędnością.cell factory

Przed badaniem żywotności komórek w fabryce komórek, bardzo ważnym etapem jest formułowanie MTT. Zazwyczaj stężenie MTT w tej metodzie wynosi 5 mg/ml. Dlatego można zważyć 0,5 g MTT, rozpuścić w 100 ml roztworu soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS) lub podłoża wolnego od czerwieni fenolowej, przefiltrować przez filtr 0,22 μm w celu usunięcia bakterii z roztworu i przechowywać w temperaturze 4°C w ciemności. . . Podczas przygotowywania i przechowywania spróbuj owinąć pojemnik folią aluminiową.

Używając metody MTT do pomiaru aktywności komórek w fabryce komórek, należy zauważyć, że MTT jest rakotwórczy, dlatego należy zachować ostrożność podczas jego stosowania. Ta metoda może być stosowana tylko do wykrywania względnej liczby komórek i względnej żywotności, ale nie bezwzględnej liczby komórek. Przy badaniu wyników czytnikiem mikropłytek, aby zapewnić liniowość wyników eksperymentalnych, absorbancja MTT powinna mieścić się w zakresie 0-0,7 w miarę możliwości.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.