Cara mengukur bilangan sel hidup dalam kilang sel

Wed May 18 16:33:54 CST 2022

A kilang sel ialah struktur satu lapisan atau berbilang lapisan bahan guna kultur sel. Semasa proses kultur sel, kita perlu memahami keadaan pertumbuhan sel dalam masa sebelum meneruskan ke langkah seterusnya. Bilangan sel yang berdaya maju boleh dikesan dengan pewarnaan biru trypan. Kaedah operasi khusus adalah seperti berikut:

1. Untuk sel yang melekat, aspirasikan medium, tambah larutan pencernaan, dan cerna dalam inkubator untuk masa yang sesuai. Selepas sel menjadi bulat, pencernaan ditamatkan dengan menambahkan isipadu medium yang sama atau lebih besar daripada isipadu pencernaan. Selepas sentrifugasi, ampaian sel dibuat dengan medium kultur;

2. Ambil 0.5ml larutan biru trypan, 0.3ml PBS dan 0.2ml penggantungan sel dan gaul rata. Kemudian adunan dibiarkan selama 1-2min. Gunakan pipet kapilari atau hujung pipet kecil 10ul untuk menarik sedikit campuran dan menyuntikkannya ke dalam hemositometer;

3. Kira sekurang-kurangnya 1000 sel dan kira bilangan sel bernoda;

4. Basuh pinggan pengiraan dan penutup penutup dengan air ultratulen dan etanol 75%;

5. Sel normal tidak akan ternoda, hanya selepas sel mati, kebolehtelapan membran sel menjadi lebih besar, biru trypan memasuki sel, dan sel kelihatan biru. Campuran tidak boleh diletakkan terlalu lama, jika tidak, sel hidup normal juga akan mengambil pewarna, yang akan menjejaskan ketepatan pengiraan;

6. Daya maju sel (%) = (jumlah bilangan sel - bilangan sel bernoda)/jumlah bilangan sel*100;

7. Seperti kaedah pengiraan sel, pewarnaan biru trypan mempunyai ralat yang besar. Ia hanya boleh mengesan tahap apoptosis awal, dan tidak boleh menunjukkan perbezaan antara kumpulan kawalan dan kumpulan eksperimen.

Dalam proses pengkulturan sel di kilang sel, sentiasa ada beberapa sel yang mati kerana pelbagai sebab. Menguasai bilangan sel hidup dan daya maju sel ialah operasi utama dalam eksperimen kultur sel dan cara yang berkesan untuk memastikan kemajuan eksperimen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.