Penggunaan plat kultur sel dalam pengesanan MTT

Wed May 18 16:30:29 CST 2022

Plat kultur selialah sejenis alat biologi. Ia dibahagikan kepada bahagian bawah rata dan bahagian bawah bulat mengikut bentuk. Bilangan telaga termasuk 6 telaga, 12 telaga, 24 telaga, 48 ​​telaga, 96 telaga, 384 telaga, dll. Ia digunakan terutamanya untuk kultur sel dan juga boleh digunakan untuk mengukur kepekatan protein, plat 96-telaga biasanya digunakan untuk pengesanan MTT.

Kaedah MTT, juga dikenali sebagai kaedah kolorimetrik MTT, ialah kaedah untuk mengesan kemandirian dan pertumbuhan sel. Prinsip pengesanan ialah suksinat dehidrogenase dalam mitokondria sel hidup boleh mengurangkan MTT eksogen kepada formazan kristal biru-ungu (Formazan) yang tidak larut dalam air dan menyimpannya di dalam sel, manakala sel mati tidak mempunyai fungsi sedemikian. Dimetil sulfoksida (DMSO) boleh melarutkan formazan dalam sel, dan nilai penyerapan cahayanya diukur pada 570nm dengan immunoassay berkaitan enzim, yang secara tidak langsung boleh mencerminkan bilangan sel hidup. Dalam julat nombor sel tertentu, jumlah pembentukan kristal MTT adalah berkadar dengan bilangan sel. Langkah pengesanan adalah seperti berikut:

1. Budayakan sel dalam 96-plat kultur sel telaga. Selepas ketumpatan sel sesuai, tambahkan 50ul MTT pada setiap telaga dan teruskan kultur selama 4 jam;

2. Sedut medium kultur yang mengandungi MTT dan tambah 150ul DMSO. Bergetar secara mendatar selama 10 minit untuk melarutkan kristal sepenuhnya. Untuk sel terampai, selepas sentrifugasi, sedut medium, dan kemudian tambah DMSO untuk larut;

3. Ukur penyerapan pada 550nm pada instrumen immunoassay berkaitan enzim (tetapkan kumpulan kawalan yang munasabah dan kumpulan kosong);

4. Kadar kemandirian sel=nilai penyerapan kumpulan eksperimen/nilai penyerapan kumpulan kawalan*100%.

Perlu diperhatikan semasa operasi bahawa MTT adalah karsinogenik. Jika boleh, cuba pakai jenis sarung tangan filem lutsinar. MTT yang disediakan perlu steril. MTT sangat sensitif kepada bakteria. Tidak kira jika anda menambah plat kultur sel 96-telaga tanpa melindunginya daripada cahaya. , Lagipun, masanya singkat, atau anda boleh mematikan lampu pada konsol.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.