Pengesanan aktiviti sel di kilang sel - kaedah MTT

Wed May 18 16:29:56 CST 2022

ialah bahan habis pakai yang sering digunakan untuk kultur sel yang melekat. Semasa percubaan, kita perlu memahami keadaan pertumbuhan sel dalam masa nyata dan membuat pelarasan yang berkaitan mengikut situasi tertentu. Daya maju sel boleh dikesan melalui kaedah MTT untuk menentukan pertumbuhan sel.Kaedah MTT, juga dikenali sebagai kaedah kolorimetrik MTT, ialah kaedah untuk mengesan kemandirian dan pertumbuhan sel. Prinsip pengesanan ialah suksinat dehidrogenase dalam mitokondria sel hidup boleh mengurangkan MTT eksogen kepada formazan kristal biru-ungu yang tidak larut air dan mendapan dalam sel, manakala sel mati tidak mempunyai fungsi sedemikian. Dimetil sulfoksida (DMSO) boleh melarutkan formazan dalam sel, dan nilai penyerapan cahayanya boleh diukur dengan ujian imunosorben berkaitan enzim pada panjang gelombang 570nm, yang secara tidak langsung boleh mencerminkan bilangan sel hidup. Dalam julat nombor sel tertentu, jumlah pembentukan kristal MTT adalah berkadar dengan nombor sel. Kaedah ini telah digunakan secara meluas dalam pengesanan aktiviti beberapa faktor aktif secara biologi, saringan ubat anti-tumor berskala besar, ujian sitotoksisiti dan ujian radiosensitiviti tumor. Ia dicirikan oleh sensitiviti dan ekonomi yang tinggi.kilang sel

Sebelum menguji daya maju sel dalam kilang sel, langkah yang sangat penting ialah penggubalan MTT. Biasanya, kepekatan MTT dalam kaedah ini ialah 5 mg/ml. Oleh itu, 0.5 g MTT boleh ditimbang, dilarutkan dalam 100 ml garam penimbal fosfat (PBS) atau medium bebas fenol merah, ditapis dengan penapis 0.22 μm untuk membuang bakteria dalam larutan, dan disimpan pada suhu 4°C dalam gelap. . . Semasa penyediaan dan penyimpanan, cuba balut bekas dengan aluminium foil.

Apabila menggunakan kaedah MTT untuk mengukur aktiviti sel di kilang sel, perlu diperhatikan bahawa MTT adalah karsinogenik, jadi berhati-hati semasa menggunakannya. Kaedah ini hanya boleh digunakan untuk mengesan nombor sel relatif dan daya maju relatif, tetapi bukan nombor sel mutlak. Apabila menguji keputusan dengan pembaca plat mikro, untuk memastikan kelinearan keputusan eksperimen, penyerapan MTT hendaklah dalam julat 0-0.7 sebanyak mungkin.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.