Kā pārnest kriokonservētas šūnas uz šūnu kultūras kolbām

Wed May 18 11:46:29 CST 2022

Šūnu kriokonservēšana ir paņēmiens, kas šūnas ievieto zemas temperatūras vidē, lai samazinātu šūnu metabolismu ilgstošai uzglabāšanai. Papildus šūnu aizsardzībai šo tehnoloģiju bieži izmanto noteiktu šūnu iegādei, dāvināšanai, apmaiņai un transportēšanai. Tātad, kā pārnest kriokonservētas šūnas uz šūnu kultūras kolbām?

Sasaldētās šūnas ir jāatdzīvina, pirms var veikt nākamo darbību. Šūnu reanimācijai jābūt ātrai, lai varētu labi saglabāties šūnu dzīvotspēja. Darbību var veikt šādi:

1. Pēc šūnu saņemšanas pārbaudiet, vai ārējais iepakojums ir pilnīgs; atveriet ārējo iepakojumu un izņemiet sausā ledū uzglabātās šūnas;

2. Pārbaudiet, vai kriokonservācijas caurule nav bojāta, vai tās saturs nav izkusis, un ātri ievietojiet izņemto kriokonservācijas cauruli 37 ℃ ūdens vannā, lai izkausētu;

3. Kriokonservācijas caurule tiek dezinficēta ar 75% spirtu un ievietota bioloģiskās drošības skapī;

4. Pievienojiet 5 ml pilnu barotni 15 ml centrifūgas mēģenē lietošanai;

5 Pievienojiet šūnu suspensiju kriokonservācijas mēģenē sagatavotajai barotnei un viegli samaisiet;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. Ievietojiet 15 ml centrifūgas mēģeni centrifūgā un centrifugējiet ar ātrumu 1000 apgr./min (apmēram 200 g) 3-5 minūtes;

7. Pievienojiet 5 ml pilnas barotnes 25 ml šūnu kultūras kolbai lietošanai;

8. Izņemiet centrifugētās šūnas, sterilizējiet tās ar spirtu un ievietojiet drošā skapī;

9. Viegli aspirējiet centrifugēto šūnu supernatantu, pievienojiet 1 ml pilnas barotnes, lai atkārtoti suspendētu šūnas;

10. Pievienojiet atkārtoti suspendētās šūnas sagatavotajā šūnu kultūras kolbā un viegli samaisiet;

11. Novērojiet inokulēto šūnu stāvokli un blīvumu mikroskopā un ievietojiet kultivēšanas kolbu 37°C inkubatorā kultivēšanai.

Šūnu reģenerācijas procesā ātra saplūšana var nodrošināt ārpusšūnu kristālu kušanu īsā laikā. laika gaitā un izvairīties no šūnu bojājumiem lēnās kušanas dēļ, kas izraisa ūdens iekļūšanu šūnās, veidojot intracelulāru pārkristalizāciju. šūnu kultūras kolbām un citiem izmantotajiem palīgmateriāliem jābūt aseptiskiem.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.