Šūnu rūpnīcu citotoksicitātes pārbaude

Wed May 18 11:44:29 CST 2022

Citotoksicitāte ir tīri šūnu nogalināšanas notikums, ko izraisa šūnas vai ķīmiskas vielas, kas nav atkarīgas no apoptozes vai nekrozes kā šūnu nāves mehānisma. Izmantojot šo testu, var spriest, vai cell factory izejvielas satur vielas, kas neveicina šūnu augšanu.

Citotoksicitāte ir ķīmisko vielu (zāļu) ietekme uz pamatstruktūru un /vai šūnu fizioloģiskie procesi, piemēram, šūnu membrānas vai citoskeleta struktūra, šūnu metabolisma process, šūnu komponentu vai produktu sintēze, degradācija vai atbrīvošanās, jonu regulēšana un šūnu dalīšanās un citi procesi, kas izraisa šūnu izdzīvošanas, proliferācijas un/vai traucējumus. funkciju, izraisot nevēlamas reakcijas. Parasti pārbaudi, vai šūnu rūpnīca ir citotoksiska, var veikt ar šādām metodēm:

1. MTT un XTT metodes: izmantojot mitohondrijās esošo enzīmu aktivitāti, specifiskus tetrazolija sāļus var pārvērst un pēc tam noteikt ar mikroplašu lasītāju;

2. LDH metode: citotoksicitāti nosaka, nosakot LDH enzīmu aktivitāti šūnu kultūras supernatantā;

3. Citas fermentatīvās metodes: piemēram, sārmainās fosfatāzes un skābes fosfatāzes aktivitātes noteikšana supernatantā;

4. Šūnu proliferācijas analīzes komplekts: normālām šūnām ir enerģisks metabolisms, un sukcināta dehidrogenāze to mitohondrijās var redukt tetrazolija sāļus (piemēram, MTT, XTT, WST-1 utt.) līdz purpursarkanām kristāliskām vielām, kas nogulsnējas ap šūnām, un pēc tam nolasa OD. vērtību ar mikroplašu lasītāju, lai noteiktu šūnu proliferācijas stāvokli.

5. Šūnu dzīvotspējas noteikšana ar fluoresceīna luminiscences metodi: Adenilāta kināze (AK) pastāv visu eikariotu un prokariotu šūnu citoplazmā, un AK var aktivizēt ADP, lai radītu ATP. Kad šūnas ir bojātas, tiek bojāta šūnu membrāna un AK tiek izdalīts kultūras supernatantā. Komplektā tiek izmantota luciferāze un luciferīns, lai izstarotu gaismu ATP iedarbībā, un to var kvantitatīvi noteikt ar hemiluminiscences instrumentu.

Pārbaudi, vai šūnu rūpnīcā ir citotoksicitāte, var veikt vairākos veidos, un šis tests ir arī viens no kārtējās pārbaudes preces, lai nodrošinātu šūnu kultūras palīgmateriālu kvalitāti.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.