English
ir palīgmateriāls, ko bieži izmanto adherentai šūnu kultūrai. Eksperimenta laikā mums ir jāsaprot šūnu augšanas stāvoklis reāllaikā un jāveic attiecīgi pielāgojumi atbilstoši konkrētajai situācijai. Šūnu dzīvotspēju var noteikt ar MTT metodi, lai noteiktu šūnu augšanu.MTT metode, kas pazīstama arī kā MTT kolorimetriskā metode, ir metode šūnu izdzīvošanas un augšanas noteikšanai. Noteikšanas princips ir tāds, ka sukcināta dehidrogenāze dzīvo šūnu mitohondrijās var reducēt eksogēno MTT līdz ūdenī nešķīstošam zili purpursarkanam kristāliskam formazānam un nogulsnēties šūnās, savukārt atmirušajām šūnām šādas funkcijas nav. Dimetilsulfoksīds (DMSO) var izšķīdināt formazānu šūnās, un tā gaismas absorbcijas vērtību var izmērīt ar enzīmu saistītu imūnsorbcijas testu 570 nm viļņa garumā, kas var netieši atspoguļot dzīvo šūnu skaitu. Noteiktā šūnu skaita diapazonā MTT kristālu veidošanās daudzums ir proporcionāls šūnu skaitam. Šī metode ir plaši izmantota dažu bioloģiski aktīvo faktoru aktivitātes noteikšanā, liela mēroga pretvēža zāļu skrīningā, citotoksicitātes testā un audzēja radiosensitivitātes testā. To raksturo augsta jutība un ekonomija.cell factory
Pirms šūnu dzīvotspējas pārbaudes šūnu rūpnīcā ļoti svarīgs solis ir MTT formulēšana. Parasti MTT koncentrācija šajā metodē ir 5 mg/ml. Tāpēc 0,5 g MTT var nosvērt, izšķīdināt 100 ml fosfātu buferšķīduma (PBS) vai barotnē, kas nesatur fenola sarkano, filtrēt ar 0,22 μm filtru, lai šķīdumā noņemtu baktērijas, un uzglabāt 4°C tumsā. . . Sagatavošanas un uzglabāšanas laikā mēģiniet ietīt konteineru ar alumīnija foliju.
Izmantojot MTT metodi šūnu aktivitātes mērīšanai šūnu rūpnīcā, jāņem vērā, ka MTT ir kancerogēna, tāpēc, lietojot to, esiet uzmanīgi. Šo metodi var izmantot tikai, lai noteiktu relatīvo šūnu skaitu un relatīvo dzīvotspēju, bet ne absolūto šūnu skaitu. Pārbaudot rezultātus ar mikroplašu lasītāju, lai nodrošinātu eksperimentālo rezultātu linearitāti, MTT absorbcijai pēc iespējas jābūt robežās no 0-0,7.
When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.