English
Kultivuojant įvairias ląsteles ląstelių kultūros kolbos yra tam tikros ląstelių kultūros vartojimo medžiagos, kurios naudojamos dažniau. Jie dažniausiai naudojami prilipusių ląstelių kultūrai, o specifikacijos svyruoja nuo 25 ml iki 225 ml. Žiurkėno inkstų ląstelių auginimo terpėje bus naudojama ši medžiaga, o konkretūs kultivavimo etapai yra tokie:
1. Paruošiamasis darbas ląstelių kultūrai:
1) Paruošti MEM terpę; aukštos kokybės galvijų vaisiaus serumas, 10%; dvigubas antikūnas 1%.
2) Kultūros sąlygos: Dujinė fazė: oras, 95%; anglies dioksido, 5 proc. Temperatūra: 37 laipsniai Celsijaus, inkubatoriaus drėgmė 70%-80%.
3) Šaldymo tirpalas: 90% serumas, 10% DMSO, paruoštas naudoti.
2. Ląstelių apdorojimas:
1) Kriokonservuotų ląstelių atkūrimas: Kriokonservuotą mėgintuvėlį, kuriame yra 1 ml ląstelių suspensijos, greitai suplakite ir atitirpinkite 37°C vandens vonioje, įdėkite į centrifugos mėgintuvėlį, kuriame yra 4-6 ml pilnos terpės, ir sumaišykite. gerai. Centrifuguokite 1000 aps./min. greičiu 3–5 min., išmeskite supernatantą ir resuspenduokite ląsteles pilnoje terpėje. Tada ląstelių suspensija buvo supilta į ląstelių kultūros kolbą, kurioje yra 6-8 ml pilnos terpės, ir kultivuojama 37 °C temperatūroje per naktį. Ląstelių augimas ir tankis buvo stebimas mikroskopu kitą dieną.
2) Ląstelių perėjimas: Jei ląstelių tankis pasiekia 80%-90%, ją galima subkultūrinti.
3) Ląstelių kriokonservavimas: gavus ląsteles, rekomenduojama užšaldyti ląstelių sėklų partiją per pirmuosius 3 kultūros pasažus, kad būtų galima atlikti tolesnius eksperimentus.
Aukščiau nurodyti specifiniai žiurkėnų inkstų ląstelių kultivavimo ląstelių kultūros kolbose žingsniai. Be to, kai ląstelės yra užšaldytos, surinkite suvirškintas ląsteles į centrifugos mėgintuvėlį pagal ląstelių perėjimo procesą ir naudokite hemocitometrą, kad suskaičiuotumėte jas, kad nustatytumėte ląstelių kriokonservavimo tankį. Rekomenduojamas bendrųjų ląstelių užšalimo tankis yra 1 × 106 ~ 1 × 107 gyvybingų ląstelių/ml.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.