English
Ląstelių kriokonservavimas yra metodas, kuriuo ląstelės laikomos žemos temperatūros aplinkoje, siekiant sumažinti ląstelių metabolizmą ilgalaikiam saugojimui. Ši technologija ne tik apsaugo ląsteles, bet ir dažnai naudojama tam tikroms ląstelėms įsigyti, dovanoti, keistis ir transportuoti. Taigi, kaip pernešti užšaldytas ląsteles į ląstelių kultūros kolbas?
Prieš atliekant kitą operaciją, užšaldytas ląsteles reikia atgaivinti. Ląstelių gaivinimas turi būti greitas, kad būtų galima gerai išsaugoti ląstelių gyvybingumą. Operaciją galima atlikti taip:
1. Gavę ląsteles patikrinkite, ar išorinė pakuotė pilna; atidarykite išorinę pakuotę ir išimkite sausame lede laikomas ląsteles;
2. Patikrinkite, ar nepažeistas kriokonservavimo vamzdelis, ar jo turinys neišsilydo, ir greitai įdėkite išimtą šaldymo vamzdelį į 37 ℃ vandens vonią, kad ištirptų;
3. Kriokonservavimo vamzdelis dezinfekuojamas 75% alkoholiu ir dedamas į biologinės saugos spintelę;
4. Įpilkite 5 ml pilnos terpės į 15 ml centrifugos mėgintuvėlį, kad galėtumėte naudoti;
5 Kriokonservavimo mėgintuvėlyje esančią ląstelių suspensiją įpilkite į paruoštą terpę ir švelniai išmaišykite;
6. Įdėkite 15 ml centrifugos mėgintuvėlį į centrifugą ir centrifuguokite 1000 aps./min. (apie 200 g) 3-5 min.;
7. Įpilkite 5 ml pilnos terpės į 25 ml ląstelių kultūros kolbą naudojimui;
8. Išimkite centrifuguotas ląsteles, sterilizuokite jas alkoholiu ir padėkite į saugią spintelę;
9. Švelniai išsiurbkite centrifuguotą ląstelių supernatantą, įpilkite 1 ml pilnos terpės, kad ląstelės resuspenduotų;
10. Sudėkite pakartotinai suspenduotas ląsteles į paruoštą ląstelių kultūros kolbą ir švelniai sumaišykite;
11. Stebėkite inokuliuotų ląstelių būklę ir tankį po mikroskopu ir įdėkite kultivavimo kolbą į 37°C temperatūros inkubatorių kultūrai.
Ląstelių atsigavimo procese greitas suliejimas gali užtikrinti, kad ekstraląsteliniai kristalai ištirps per trumpą laiką. laiko ir išvengti ląstelių pažeidimo dėl lėto lydymosi, dėl kurio vanduo prasiskverbia į ląsteles ir susidaro tarpląstelinė perkristalizacija. ląstelių kultūros kolbos ir kitos naudojamos medžiagos turi būti aseptinės.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.