Kaip perkelti ląsteles į ląstelių kultūros kolbas

Wed May 18 11:58:49 CST 2022

Subkultūra reiškia kultūros padalijimą į mažas dalis, pakartotinai pasėjant jas į kitą kultūros indą (butelį) ir tada kultivavimą. Ląstelių kultūros kolbos yra dažniausiai naudojamos eksploatacinės medžiagos auginant ląsteles. Taigi, kaip perkultūrinti ląsteles kolboje?

Paprastai ląstelės kultūros kolbose išauga į tankų vienasluoksnį sluoksnį ir iš esmės yra prisotintos. Kad ląstelės galėtų toliau daugintis ir plėsti ląstelių skaičių, būtina atlikti pasažo operacijas. Pakabintas ląsteles galima atskirti tiesiogiai, o prilipusias ląsteles reikia suvirškinti prieš jas atskiriant. Paprastai proteolitiniai fermentai (pvz., tripsinas) naudojami prilipusioms ląstelėms virškinti į atskiras ląsteles. Virškinimui pagerinti taip pat galima pridėti etilendiaminotetraacto rūgšties (EDTA). Stebėkite ląsteles, kol ląstelės taps apvalios ir atsiskirs nuo buteliuko sienelės. Šis procesas dažnai trunka 5-15 minučių. Kad nesusidarytų ląstelių gumulėlių, nebarstykite ląstelių kultūros kolbų, kol ląsteles virškinate.

How to passage the cells in the cell culture flasks

Ypač sunkiai virškinamoms ląstelėms galite įpilti tripsino EDTA skaidymo tirpalo ir ląsteles laikyti 37°C temperatūroje. palengvinti virškinimą. Kai ląstelės bus atskirtos nuo buteliuko sienelės, nedelsdami įpilkite pilnos terpės su serumu, kad sustabdytumėte virškinimą. Tam tikri baltymai serume gali slopinti kasą. Fermentų aktyvumas. Paprastai centrifuguoti nereikia. Jei ląstelėms reikia terpės be serumo arba mažai serumo, centrifuguokite 125 000 g 5 minutes, tada išmeskite nutrauktą terpę, įpilkite tinkamos naujos terpės ir švelniai sumaišykite ląsteles prieš subkultūrą.

Ląstelių praėjimo santykis paprastai yra 1:2. -1:20, priklausomai nuo ląstelės tipo. Perėjimo procese tripsinas pažeis kai kurių ląstelių ląstelių membraną. Galite naudoti ląstelių grandiklį, kad švelniai subraižytumėte ląsteles, įpilkite atitinkamą terpės kiekį, švelniai pipete sumaišykite ląsteles ir perkelkite jas į naują auginimo kolbą.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.