English
yra vieno sluoksnio arba daugiasluoksnė ląstelių kultūros vartojimo medžiagų struktūra. Ląstelių kultūros proceso metu prieš pereidami prie kito žingsnio turime laiku suvokti ląstelių augimo būseną. Gyvybingų ląstelių skaičius gali būti aptiktas dažant tripano mėlynąja spalva. Konkretus veikimo metodas yra toks:1. Prilipusioms ląstelėms išsiurbkite terpę, įpilkite virškinimo tirpalo ir atitinkamą laiką viršykite inkubatoriuje. Kai ląstelės tapo apvalios, virškinimas buvo nutrauktas pridedant tokį pat arba didesnį terpės tūrį nei virškinimo tirpalo tūris. Po centrifugavimo ląstelių suspensija gaminama auginimo terpėje;cell factory
2. Paimkite 0,5 ml tripano mėlynojo tirpalo, 0,3 ml PBS ir 0,2 ml ląstelių suspensijos ir gerai išmaišykite. Tada mišinys paliekamas 1-2 min. Kapiliarine pipete arba 10 ul mažu pipetės antgaliu ištraukite nedidelį mišinio kiekį ir įšvirkškite jį į hemocitometrą;
3. Suskaičiuokite mažiausiai 1000 ląstelių ir suskaičiuokite nudažytų ląstelių skaičių;
4. Skaičiavimo plokštelę ir dengiamąjį stiklelį nuplaukite itin grynu vandeniu ir 75 % etanoliu;
5. Normalios ląstelės nebus nudažytos, tik po to, kai ląstelės miršta, padidėja ląstelių membranos pralaidumas, į ląsteles patenka tripano mėlynumo, o ląstelės atrodo mėlynos. Mišinio negalima dėti per ilgai, kitaip normalios gyvos ląstelės taip pat pasiims dažus, o tai turės įtakos skaičiavimo tikslumui;
6. Ląstelių gyvybingumas (%) = (bendras ląstelių skaičius – nudažytų ląstelių skaičius)/bendras ląstelių skaičius*100;
7. Kaip ir ląstelių skaičiavimo metodas, dažymas tripano mėlynuoju būdu turi didelę paklaidą. Jis gali aptikti tik ankstyvą apoptozės lygį ir negali parodyti skirtumo tarp kontrolinės ir eksperimentinės grupės.
Ląstelių fabrike kultivuojant ląsteles, visada yra keletas ląstelių, kurios miršta dėl įvairių priežasčių. Gyvų ląstelių skaičiaus ir ląstelių gyvybingumo įsisavinimas yra pagrindinė ląstelių kultūros eksperimentų operacija ir veiksmingas būdas užtikrinti eksperimento eigą.
In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.