Keturi mikoplazmos užteršimo ląstelių gamyklose aptikimo metodai

Wed May 18 11:57:52 CST 2022

Užteršimas mikoplazmomis yra labai dažna problema, kai auginamos ląstelės ląstelių gamyklos. Skirtingai nuo kitų užteršimų, mikoplazmomis užterštos ląstelės paprastai nedrumsčiasi, todėl sunku įvertinti plika akimi. Yra keturi būdai, kaip nustatyti, ar ląstelės yra užterštos mikoplazma:

1. DNR fluorescencinis dažymas

DNR dažymo fluorescenciniu būdu metodas pagrįstas principu, kad fluorescencinis dažiklis Hoechst33258 gali prisijungti prie mikoplazmos DNR srities, kurioje gausu AT bazių. Fluorescenciniai taškai yra mikoplazmos DNR, kurioje gausu AT bazinių sričių.

2. PGR technologija

Konkretūs pradmenys suprojektuoti pagal konservuotas Mycoplasma genomo sekas, amplifikuojama tiriamo mėginio nukleorūgštis, o diagnozė nustatoma analizuojant amplifikuoto produkto dydį. PGR aptikimo technologija naudojama mikoplazmos užterštumui aptikti, trumpas ciklas, didelis jautrumas, geras specifiškumas, paprastas valdymas ir gali aptikti daug mėginių vienu metu.

3. Su fermentais susietas imunosorbentinis tyrimas (ELISA)

ELISA naudojamas mikoplazmos užteršimui aptikti, pasižymintis geru specifiškumu ir jautrumu ir gali užbaigti aptikti daug mėginių vienu metu. Jis pasižymi paprasto, greito ir kiekybinio kokybinio aptikimo savybėmis.

4. Elektroninis mikroskopas

Paprastai ląstelės ląstelių gamyklose kultivuojamos 48–72 valandas. Prieš ląstelėms beveik susiliejant, ląstelės virškinamos tripsinu, kad susidarytų ląstelių suspensija, fiksuojamos, įterpiamos ir supjaustomos prieš stebėjimą.

Aukščiau pateikti keturi dažniausiai naudojami aptikimo metodai nustatant užterštumą mikoplazma ląstelių gamyklose. Šiuo metu žinoma daugiau nei 20 rūšių mikoplazmų, kurios užteršia ląsteles, iš kurių daugiau nei 95 % yra burnos mikoplazmos, todėl operatoriai, augindami ląsteles, turėtų atkreipti dėmesį į aseptinį darbą.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.