Ląstelių gamyklų citotoksiškumo tyrimai

Wed May 18 11:57:23 CST 2022

Citotoksiškumas yra grynai ląstelių žudymo įvykis, kurį sukelia ląstelės arba cheminės medžiagos, kuri nėra pagrįsta apoptoze ar nekroze kaip ląstelių mirties mechanizmu. Atliekant šį testą galima nuspręsti, ar cell factory žaliavose yra medžiagų, kurios neskatina ląstelių augimo.

Citotoksiškumas – tai cheminių medžiagų (vaistų) poveikis pagrindinei struktūrai ir / arba fiziologiniai ląstelių procesai, tokie kaip ląstelės membranos arba citoskeleto struktūra, ląstelių metabolizmo procesas, sintezė, ląstelių komponentų arba produktų skilimas arba išsiskyrimas, jonų reguliavimas ir ląstelių dalijimasis bei kiti procesai, sukeliantys ląstelių išlikimo, proliferacijos ir (arba) funkcija, sukelianti nepageidaujamas reakcijas. Paprastai bandymą, ar ląstelių gamykla yra citotoksiška, galima atlikti šiais metodais:

1. MTT ir XTT metodai: naudojant mitochondrijose esančių fermentų aktyvumą, specifinės tetrazolio druskos gali būti konvertuojamos ir aptinkamos mikroplokštelių skaitytuvu;

2. LDH metodas: citotoksiškumas nustatomas nustatant LDH fermentinį aktyvumą ląstelių kultūros supernatante;

3. Kiti fermentiniai metodai: tokie kaip šarminės fosfatazės ir rūgštinės fosfatazės aktyvumo nustatymas supernatante;

4. Ląstelių proliferacijos analizės rinkinys: normalios ląstelės turi energingą metabolizmą, o sukcinato dehidrogenazė jų mitochondrijose gali redukuoti tetrazolio druskas (pvz., MTT, XTT, WST-1 ir kt.) į purpurines kristalines medžiagas, nusėdusias aplink ląsteles, ir tada nuskaityti OD. vertę mikroplokštelių skaitytuvu, kad nustatytų ląstelių proliferacijos būseną.

5. Ląstelių gyvybingumo nustatymas fluoresceino liuminescencijos metodu: Adenilato kinazė (AK) egzistuoja visų eukariotinių ir prokariotinių ląstelių citoplazmoje, o AK gali aktyvuoti ADP, kad susidarytų ATP. Kai ląstelės pažeidžiamos, pažeidžiama ląstelės membrana ir AK išsiskiria į kultūros supernatantą. Rinkinyje naudojami luciferazė ir liuciferinas, kad spinduliuotų šviesą, veikiant ATP, ir gali būti kiekybiškai aptiktas chemiliuminescenciniu prietaisu.

Tikrinti, ar ląstelių gamykla pasižymi citotoksiškumu, galima atlikti keliais būdais. Šis testas taip pat yra vienas iš įprastiniais bandymais, siekiant užtikrinti ląstelių kultūros vartojimo reikmenų kokybę.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.