English
ląstelių kultūros plokštelėsyra savotiškas biologinis įrankis. Pagal formą jis skirstomas į plokščią dugną ir apvalų dugną. Į šulinių skaičių įeina 6 šulinėliai, 12 šulinių, 24 šulinėliai, 48 šulinėliai, 96 šulinėliai, 384 šulinėliai ir tt Jis daugiausia naudojamas ląstelių kultūrai ir taip pat gali būti naudojamas matuoti baltymų koncentracija, MTT aptikimui dažniausiai naudojamos 96 šulinėlių plokštelės.
MTT metodas, taip pat žinomas kaip MTT kolorimetrinis metodas yra ląstelių išlikimo ir augimo nustatymo metodas. Aptikimo principas yra tas, kad gyvų ląstelių mitochondrijose esanti sukcinato dehidrogenazė gali redukuoti egzogeninį MTT į vandenyje netirpią mėlynai violetinę kristalinę formazaną (Formazan) ir nusodinti jį ląstelėse, o negyvos ląstelės tokios funkcijos neturi. Dimetilsulfoksidas (DMSO) gali ištirpinti formazaną ląstelėse, o jo šviesos sugerties vertė matuojama esant 570 nm naudojant su fermentu susietą imuninį tyrimą, kuris gali netiesiogiai atspindėti gyvų ląstelių skaičių. Tam tikrame ląstelių skaičiaus diapazone MTT kristalų susidarymo kiekis yra proporcingas ląstelių skaičiui. Aptikimo veiksmai yra tokie:
1.
Kultūruokite ląsteles 96 šulinėlių ląstelių kultūros plokštelė. Kai ląstelių tankis yra tinkamas, į kiekvieną šulinėlį įpilkite 50 ul MTT ir toliau kultivuokite 4 valandas;
2.
Išsiurbkite auginimo terpę, kurioje yra MTT, ir įpilkite 150 ul DMSO. Vibruokite horizontaliai 10 minučių, kad kristalai visiškai ištirptų. Suspenduotoms ląstelėms po centrifugavimo išsiurbkite terpę ir įpilkite DMSO, kad ištirptų;
3. Išmatuokite absorbciją esant 550 nm su fermentu susietu imunologiniu tyrimo prietaisu (nustatykite pagrįstą kontrolinę ir tuščiąją grupę);
4. Ląstelių išgyvenamumas=eksperimentinės grupės sugerties vertė/kontrolinės grupės absorbcijos vertė*100%.
Operacijos metu reikia pažymėti, kad MTT yra kancerogeninis. Jei įmanoma, pabandykite mūvėti tokias permatomas plėvelines pirštines. Paruoštas MTT turi būti sterilus. MTT yra labai jautrus bakterijoms. Nesvarbu, ar pridėsite į 96 šulinėlių ląstelių kultūros plokštelę neapsaugodami jos nuo šviesos. , Juk laiko trumpa, arba galima išjungti apšvietimą ant pulto.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.