細胞工場における細胞の活動検出-MTT法

Wed May 18 17:14:16 CST 2022

は、付着細胞培養によく使用される消耗品です。実験では、細胞の増殖状態をリアルタイムで把握し、状況に応じて調整する必要があります。細胞生存率は、MTT法で検出して細胞増殖を測定できます。 MTT法は、MTT比色法とも呼ばれ、細胞の生存と増殖を検出する方法です。検出原理は、生細胞のミトコンドリアにあるコハク酸デヒドロゲナーゼは、外因性MTTを水不溶性の青紫色の結晶性ホルマザンに還元して細胞に沈着させることができますが、死んだ細胞にはそのような機能はありません。ジメチルスルホキシド(DMSO)は細胞内のホルマザンを溶解することができ、その光吸収値は、生細胞の数を間接的に反映できる波長570nmでの酵素免疫測定法によって測定できます。特定の細胞数の範囲内で、MTT結晶形成の量は細胞数に比例します。この方法は、いくつかの生物学的に活性な因子の活性検出、大規模な抗腫瘍薬のスクリーニング、細胞毒性試験、および腫瘍放射線感受性アッセイで広く使用されています。高感度と経済性が特徴です。 cellfactory

細胞工場で細胞の生存率をテストする前に、非常に重要なステップはMTTの処方です。通常、このメソッドのMTT濃度は5 mg/mlです。したがって、0.5 gのMTTを秤量し、100 mlのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)またはフェノールレッドを含まない培地に溶解し、0.22μmフィルターでろ過して溶液中の細菌を除去し、暗所で4°Cで保存できます。 。 。準備・保管の際は、アルミホイルで包んでみてください。

MTT法を用いて細胞工場で細胞活性を測定する場合、MTTは発がん性がありますのでご注意ください。この方法は、相対的な細胞数と相対的な生存率を検出するためにのみ使用でき、絶対的な細胞数を検出するためには使用できません。マイクロプレートリーダーで結果をテストする場合、実験結果の直線性を確保するために、MTTの吸光度は可能な限り0〜0.7の範囲にする必要があります。

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.