Hvernig á að mæla fjölda lifandi frumna í frumuverksmiðju

Wed May 18 14:49:52 CST 2022

A cell factory er eins lags eða margra laga uppbygging af frumuræktunarvörum. Í frumuræktunarferlinu þurfum við að átta okkur á vaxtarástandi frumanna í tíma áður en haldið er áfram í næsta skref. Hægt er að greina fjölda lífvænlegra frumna með trypan bláum litun. Sértæka rekstraraðferðin er sem hér segir:

1. Fyrir viðloðandi frumur, sogið efnið út, bætið meltingarlausninni út í og ​​meltið í útungunarvélinni í viðeigandi tíma. Eftir að frumurnar voru orðnar kringlóttar var meltingunni hætt með því að bæta við jafnmiklu eða meira magni af miðli en rúmmál meltingarefnisins. Eftir skilvindu er frumusviflausnin gerð með ræktunarmiðli;

2. Taktu 0,5 ml trypan bláa lausn, 0,3 ml PBS og 0,2 ml frumusviflausn og blandaðu vel saman. Síðan var blandan látin standa í 1-2mín. Notaðu háræðapípettu eða 10ul lítinn pípettuodd til að draga lítið magn af blöndunni og sprauta henni í blóðfrumnamælirinn;

3. Teldu að minnsta kosti 1000 frumur og teldu fjölda litaðra frumna;

4. Þvoðu talningarplötuna og hyljarann ​​með ofurhreinu vatni og 75% etanóli;

5. Venjulegar frumur verða ekki litaðar, aðeins eftir að frumurnar deyja, verður gegndræpi frumuhimnunnar stærri, trypanblátt fer inn í frumurnar og frumurnar virðast bláar. Ekki má setja blönduna of lengi, annars taka venjulegar lifandi frumur upp litarefnið, sem hefur áhrif á talningarnákvæmni;

6. Frumulífvænleiki (%) = (heildarfjöldi frumna - fjöldi litaðra frumna)/heildarfjöldi frumna*100;

7. Eins og frumutalningaraðferðin hefur trypan blár litun mikla villu. Það getur aðeins greint snemmbúið apoptosis stig og getur ekki sýnt muninn á samanburðarhópnum og tilraunahópnum.

Í því ferli að rækta frumur í frumuverksmiðju eru alltaf einhverjar frumur sem deyja af ýmsum ástæðum. Að ná tökum á fjölda lifandi frumna og lífvænleika frumna er lykilaðgerð í frumuræktunartilraunum og áhrifarík leið til að tryggja framgang tilraunarinnar.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.