Notkun frumuræktunarplötu í MTT uppgötvun

Wed May 18 14:47:18 CST 2022

Frumuræktunarplataner eins konar líffræðilegt tæki. Það skiptist í flatan botn og kringlóttan botn eftir lögun. Fjöldi brunna inniheldur 6 brunna, 12 brunna, 24 brunna, 48 ​​holur, 96 brunna, 384 brunna osfrv. Hann er aðallega notaður til frumuræktunar og er einnig hægt að nota til að mæla próteinstyrkur, 96-brunn plötur eru almennt notaðar fyrir MTT greiningu.

MTT aðferð, einnig þekkt sem MTT colorimetric method, er aðferð til að greina lifun og vöxt frumna. Uppgötvunarreglan er sú að súksínat dehýdrógenasinn í hvatberum lifandi frumna getur dregið úr utanaðkomandi MTT í vatnsóleysanlegt blá-fjólublátt kristalformazan (Formazan) og sett það í frumurnar, á meðan dauðar frumur hafa enga slíka virkni. Dímetýlsúlfoxíð (DMSO) getur leyst upp formazan í frumum og ljósgleypni þess er mælt við 570nm með ensímtengdri ónæmisgreiningu, sem getur óbeint endurspeglað fjölda lifandi frumna. Innan ákveðins fjölda frumna er magn MTT kristalmyndunar í réttu hlutfalli við fjölda frumna. Uppgötvunarskrefin eru sem hér segir:

1. Ræktaðu frumurnar í 96-brunna frumuræktunarplata. Eftir að frumuþéttleiki er viðeigandi skaltu bæta 50 ul MTT í hvern brunn og halda áfram að rækta í 4 klukkustundir;

2. Sogið burt ræktunarmiðilinn sem inniheldur MTT og bætið við 150 ul af DMSO. Titraðu lárétt í 10 mínútur til að leysa upp kristallana að fullu. Fyrir sviffrumur, eftir skilvindu, sogið burt miðlinum og bætið síðan DMSO við til að leysa upp;

3. Mældu gleypni við 550nm á ensímtengda ónæmisprófunartækinu (stilltu hæfilegan samanburðarhóp og auðan hóp);

4. Frumulifunarhlutfall=gleypnigildi tilraunahóps/gleypnigildi samanburðarhóps*100%.

Takið skal fram við aðgerðina að MTT er krabbameinsvaldandi. Ef mögulegt er, reyndu að vera með gagnsæja filmuhanska. Tilbúinn MTT þarf að vera dauðhreinsaður. MTT er mjög viðkvæmt fyrir bakteríum. Það skiptir ekki máli hvort þú bætir við 96-brunna frumuræktunarplötuna án þess að verja hana fyrir ljósi. , Eftir allt saman, tíminn er stuttur, eða þú getur slökkt á lýsingu á stjórnborðinu.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.