Virknigreining frumna í frumuverksmiðjum - MTT aðferð

Wed May 18 14:46:54 CST 2022

er neysluvara sem er oft notuð til viðloðandi frumuræktunar. Meðan á tilrauninni stendur þurfum við að átta okkur á vaxtarástandi frumanna í rauntíma og gera viðeigandi breytingar í samræmi við sérstakar aðstæður. Hægt er að greina lífvænleika frumna með MTT aðferð til að ákvarða frumuvöxt.MTT aðferð, einnig þekkt sem MTT litmælingaaðferð, er aðferð til að greina frumulíf og vöxt. Uppgötvunarreglan er sú að súksínat dehýdrógenasi í hvatberum lifandi frumna getur dregið úr utanaðkomandi MTT í vatnsóleysanlegt blá-fjólublát kristallað formazan og sett í frumur, á meðan dauðar frumur hafa enga slíka virkni. Dímetýlsúlfoxíð (DMSO) getur leyst upp formazan í frumum og ljósgleypni þess er hægt að mæla með ensímtengdri ónæmissogandi prófun við 570nm bylgjulengd, sem getur óbeint endurspeglað fjölda lifandi frumna. Innan ákveðins frumunúmerasviðs er magn MTT kristalmyndunar í réttu hlutfalli við frumunúmerið. Þessi aðferð hefur verið mikið notuð við virknigreiningu sumra líffræðilega virkra þátta, viðfangsmikilli skimun gegn æxlislyfjum, frumueiturhrifaprófi og æxlisgeislanæmisprófi. Það einkennist af mikilli næmni og hagkvæmni.cell factory

Áður en lífvænleiki frumna í frumuverksmiðjunni er prófað er mjög mikilvægt skref mótun MTT. Venjulega er MTT styrkurinn í þessari aðferð 5 mg/ml. Þess vegna er hægt að vega 0,5 g af MTT, leysa það upp í 100 ml af fosfatbuðrað saltvatni (PBS) eða fenólrautt efni, sía með 0,22 μm síu til að fjarlægja bakteríur í lausninni og geyma við 4°C í myrkri. . . Við undirbúning og geymslu, reyndu að vefja ílátið með álpappír.

Þegar MTT aðferðin er notuð til að mæla frumuvirkni í frumuverksmiðjunni, skal tekið fram að MTT er krabbameinsvaldandi, svo farið varlega í notkun. Þessi aðferð er aðeins hægt að nota til að greina hlutfallslegan frumufjölda og hlutfallslega lífvænleika, en ekki algeran frumufjölda. Þegar niðurstöðurnar eru prófaðar með örplötulesara, til að tryggja línuleika tilraunaniðurstaðna, ætti MTT gleypni að vera á bilinu 0-0,7 eins mikið og mögulegt er.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.