Hogyan passzáljuk a sejteket a sejttenyésztő lombikban

Wed May 18 11:30:52 CST 2022

A szubkultúra azt a folyamatot jelenti, amikor a tenyészetet apró részekre osztják, újra beoltják egy másik kultúredénybe (palackba), majd tenyésztik. A Sejttenyésztő lombikok gyakran használt fogyóeszközök a sejtek tenyésztéséhez. Tehát hogyan lehet továbbtenyészteni a sejteket a lombikban?

Általában a sejttenyésztő lombikokban lévő sejtek sűrű egyrétegűvé nőnek, és alapvetően telítettek. Annak érdekében, hogy a sejtek továbbra is szaporodhassanak és a sejtek száma bővüljön, passzázs műveleteket kell végrehajtani. A felfüggesztett sejtek közvetlenül elválaszthatók, míg a tapadó sejteket meg kell emészteni, mielőtt szétválaszthatnák őket. Általában proteolitikus enzimeket (például tripszint) használnak a tapadó sejtek egysejtekké történő emésztésére. Etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) is hozzáadható az emésztés javítására. Figyelje meg a sejteket, amíg a sejtek gömbölyűvé nem válnak, és le nem válnak a palack faláról. Ez a folyamat gyakran 5-15 percig tart. A sejtcsomók elkerülése érdekében ne ütögesse meg a sejttenyésztő lombikokat a sejtek emésztési folyamata közben.

How to passage the cells in the cell culture flasks

A különösen nehezen emészthető sejtek esetében tripszin EDTA emésztőoldatot adhat hozzá, és a sejteket 37°C-ra helyezheti. megkönnyíti az emésztést. Miután a sejteket elválasztottuk a palack falától, azonnal adjunk hozzá egy komplett, szérumot tartalmazó táptalajt, hogy megállítsuk az emésztést. A szérum bizonyos fehérjéi gátolhatják a hasnyálmirigyet. Enzimaktivitás. Általában a centrifugálás nem szükséges. Ha a sejtek szérummentes vagy alacsony szérumtartalmú táptalajt igényelnek, centrifugálja 125 000 g-vel 5 percig, majd dobja ki a megszakított táptalajt, adjon hozzá megfelelő új táptalajt, és óvatosan keverje össze a sejteket a szubkultúra előtt.

A sejtpasszolás aránya általában 1:2 -1:20, cellatípustól függően. Az áthaladás során a tripszin károsítja egyes sejtek sejtmembránját. Sejtkaparóval finoman lekaparhatja a sejteket, hozzáadhat megfelelő mennyiségű táptalajt, óvatosan pipettázva keverheti össze a sejteket, és áthelyezheti őket egy új tenyésztőlombikba.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.