Hogyan mérjük meg az élő sejtek számát egy sejtgyárban

Wed May 18 11:30:45 CST 2022

A cell factory sejtkultúra fogyóeszközök egyrétegű vagy többrétegű szerkezete. A sejttenyésztési folyamat során időben meg kell értenünk a sejtek növekedési állapotát, mielőtt a következő lépésre lépnénk. Az életképes sejtek száma tripánkék festéssel detektálható. A konkrét működési mód a következő:

1. Tapadó sejtek esetén szívja le a táptalajt, adja hozzá az emésztőoldatot, és megfelelő ideig emésztse az inkubátorban. Miután a sejtek gömbölyűvé váltak, az emésztést az emésztési maradék térfogatával azonos vagy nagyobb térfogatú táptalaj hozzáadásával fejeztük be. Centrifugálás után a sejtszuszpenziót tápközeggel készítjük;

2. Vegyünk 0,5 ml tripánkék oldatot, 0,3 ml PBS-t és 0,2 ml sejtszuszpenziót, és jól keverjük össze. Ezután a keveréket 1-2 percig állni hagyjuk. Kapilláris pipetta vagy 10 ul-es kis pipettahegy segítségével szívjon fel egy kis mennyiségű keveréket, és fecskendezze be a hemocitométerbe;

3. Számoljon meg legalább 1000 sejtet, és számolja meg a festett sejtek számát;

4. Mossa le a számlálólemezt és a fedőlemezt ultratiszta vízzel és 75%-os etanollal;

5. A normál sejtek nem festődnek, csak a sejtek elpusztulása után nő a sejtmembrán permeabilitása, a tripánkék bejut a sejtekbe, és a sejtek kék színűek. A keveréket nem szabad túl sokáig elhelyezni, különben a normál élő sejtek is felveszik a festéket, ami befolyásolja a számlálási pontosságot;

6. Sejtéletképesség (%) = (sejtek teljes száma - festett sejtek száma)/sejtek teljes száma*100;

7. A sejtszámlálási módszerhez hasonlóan a tripánkék festésnek is nagy a hibája. Csak a korai apoptózis szintjét tudja kimutatni, és nem tudja kimutatni a különbséget a kontroll és a kísérleti csoport között.

A sejtgyári sejttenyésztés során mindig vannak olyan sejtek, amelyek különböző okok miatt elpusztulnak. Az élő sejtek számának és a sejtek életképességének elsajátítása kulcsfontosságú művelet a sejttenyésztési kísérletekben, és hatékony módja a kísérlet előrehaladásának biztosításának.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.