Négy kimutatási módszer a mikoplazma-szennyeződés kimutatására sejtgyárakban

Wed May 18 11:29:34 CST 2022

A mycoplasma szennyeződés nagyon gyakori probléma a cellfaries sejtek tenyésztésekor. Más szennyeződésekkel ellentétben a mikoplazmával fertőzött sejtek általában nem zavarosodnak el, így szabad szemmel nehéz megítélni. Négyféleképpen lehet megállapítani, hogy a sejtek fertőzöttek-e mikoplazmával:

1. DNS fluoreszcens festés

A DNS fluoreszcens festési módszer azon az elven alapul, hogy a Hoechst33258 fluoreszcens festék képes kötődni a mikoplazma DNS AT bázisban gazdag régiójához. A fluoreszcens pontok AT bázis régiókban gazdag mikoplazma DNS.

2. PCR technológia

A specifikus primereket a Mycoplasma genomban lévő konzervált szekvenciák alapján tervezzük, a vizsgálandó minta nukleinsavát amplifikáljuk, és a diagnózis felállítása az amplifikált termék méretének elemzésével történik. A PCR detektálási technológiát a mikoplazma szennyeződés kimutatására használják, rövid ciklussal, nagy érzékenységgel, jó specificitással, egyszerű művelettel, és egyszerre nagy számú mintát képes kimutatni.

3. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

ELISA-t a mikoplazma-szennyeződés kimutatására használnak, jó specificitással és érzékenységgel, és egyszerre nagyszámú minta kimutatását teszi lehetővé. Az egyszerű, gyors és kvantitatív minőségi észlelés jellemzőivel rendelkezik.

4. Elektronmikroszkóp

Általában a sejtgyárakban a sejteket 48-72 órán keresztül tenyésztik. Mielőtt a sejtek majdnem összefolynának, a sejteket tripszinnel emésztjük, hogy sejtszuszpenziót készítsünk, rögzítjük, beágyazzuk, és a megfigyelés előtt felszeleteljük.

A fenti négy általánosan használt kimutatási módszer a mikoplazma-szennyeződés kimutatására sejtgyárakban. Jelenleg több mint 20 fajta mikoplazmáról ismert, hogy szennyezi a sejteket, ezeknek több mint 95%-a szájüregi mikoplazma, ezért a kezelőknek ügyelniük kell az aszeptikus működésre a sejttenyésztés során.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.