Sejtek aktivitás kimutatása sejtgyárakban - MTT módszer

Wed May 18 11:27:12 CST 2022

A cell factory egy fogyóeszköz, amelyet gyakran használnak adherens sejttenyészethez. A kísérlet során valós időben kell megragadnunk a sejtek növekedési állapotát, és az adott helyzetnek megfelelően megfelelő módosításokat kell végrehajtanunk. A sejtek életképességét MTT módszerrel lehet kimutatni a sejtek növekedésének meghatározására.

MTT módszer, más néven MTT kolorimetriás módszer, egy módszer a sejtek túlélésének és növekedésének kimutatására. A kimutatás elve az, hogy az élő sejtek mitokondriumában a szukcinát-dehidrogenáz képes az exogén MTT-t vízben oldhatatlan kék-lila kristályos formazánná redukálni és a sejtekben lerakni, míg az elhalt sejteknek nincs ilyen funkciója. A dimetil-szulfoxid (DMSO) képes feloldani a formazánt a sejtekben, fényelnyelési értéke pedig 570 nm-es hullámhosszon mérhető enzimkapcsolt immunszorbens vizsgálattal, amely közvetve tükrözi az élő sejtek számát. Egy bizonyos sejtszám-tartományon belül az MTT kristályképződés mértéke arányos a sejtszámmal. Ezt a módszert széles körben alkalmazzák egyes biológiailag aktív faktorok aktivitásának kimutatásában, nagyszabású daganatellenes gyógyszerszűrésben, citotoxicitási tesztben és tumor sugárérzékenységi vizsgálatban. Nagy érzékenység és gazdaságosság jellemzi.

A sejtek életképességének sejtgyári tesztelése előtt nagyon fontos lépés az MTT összeállítása. Ebben a módszerben az MTT-koncentráció jellemzően 5 mg/ml. Ezért 0,5 g MTT lemérhető, feloldható 100 ml foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS) vagy fenolvörös mentes tápközegben, 0,22 μm-es szűrővel szűrhető az oldatban lévő baktériumok eltávolítása érdekében, és 4°C-on, sötétben tárolható. . . Az elkészítés és tárolás során a tartályt próbáljuk meg alufóliával becsomagolni.

A sejtgyári sejtaktivitás mérésénél az MTT módszerrel figyelembe kell venni, hogy az MTT rákkeltő hatású, ezért használatánál legyen óvatos. Ez a módszer csak a relatív sejtszám és a relatív életképesség kimutatására használható, az abszolút sejtszám azonban nem. Az eredmények mikrolemez-leolvasóval történő tesztelésekor a kísérleti eredmények linearitása érdekében az MTT abszorbanciája lehetőleg 0-0,7 tartományban legyen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.