Étapes spécifiques pour la culture de cellules rénales de hamster dans des flacons de culture cellulaire

Thu May 19 09:16:16 CST 2022

Lors de la culture de diverses cellules, flacons de culture cellulaire sont une sorte de consommables de culture cellulaire qui sont utilisés plus fréquemment. Ils sont principalement utilisés pour la culture de cellules adhérentes, et les spécifications vont de 25 ml à 225 ml. Le milieu de culture de cellules rénales de hamster utilisera ce consommable, et les étapes spécifiques de sa culture sont les suivantes :

1. Travaux préparatoires pour la culture cellulaire :

1) Préparer le milieu MEM ; sérum bovin fœtal de haute qualité, 10%; double anticorps 1%.

2) Conditions de culture : Phase gazeuse : air, 95% ; dioxyde de carbone, 5%. Température : 37 degrés Celsius, humidité de l'incubateur de 70 % à 80 %.

3) Solution de congélation : 90 % de sérum, 10 % de DMSO, prêt à l'emploi.

2. Traitement des cellules :

1) Récupération des cellules cryoconservées : Agiter et décongeler rapidement le tube cryoconservé contenant 1 mL de suspension cellulaire dans un bain-marie à 37 °C, l'ajouter à un tube à centrifuger contenant 4 à 6 mL de milieu complet et mélanger Bien. Centrifuger à 1000 tr/min pendant 3 à 5 minutes, jeter le surnageant et remettre en suspension les cellules dans un milieu complet. La suspension cellulaire a ensuite été ajoutée à un flacon de culture cellulaire contenant 6 à 8 ml de milieu complet et cultivée à 37 °C pendant une nuit. La croissance cellulaire et la densité cellulaire ont été observées au microscope le lendemain.

2) Passage cellulaire : si la densité cellulaire atteint 80 % à 90 %, elle peut être sous-cultivée.

3) Cryoconservation des cellules : après avoir reçu le cellules, il est recommandé de congeler un lot de graines de cellules dans les 3 premiers passages de culture pour des expériences ultérieures. De plus, lorsque les cellules sont cryoconservées, collectez les cellules digérées dans un tube à centrifuger selon le processus de passage cellulaire et utilisez un hémocytomètre pour les compter afin de déterminer la densité de cryoconservation des cellules. La densité de congélation recommandée des cellules générales est de 1 × 106 ~ 1 × 107 cellules viables/ml.

The above are the specific steps for culturing hamster kidney cells in cell culture flasks. In addition, when cells are cryopreserved, collect the digested cells into a centrifuge tube according to the process of cell passage, and use a hemocytometer to count them to determine the cryopreservation density of cells. The recommended freezing density of general cells is 1×106~1×107 viable cells/ml.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.