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La contamination par les mycoplasmes est un problème très courant lors de la culture de cellules dans usines cellulaires. Contrairement à d'autres contaminations, les cellules contaminées par les mycoplasmes ne deviennent généralement pas troubles, il est donc difficile de juger à l'œil nu. Il existe quatre façons de déterminer si des cellules sont contaminées par des mycoplasmes :
1. Coloration par fluorescence de l'ADN
La méthode de coloration par fluorescence de l'ADN est basée sur le principe que le colorant fluorescent Hoechst33258 peut se lier à la région riche en bases AT dans l'ADN des mycoplasmes. Les points fluorescents sont de l'ADN de mycoplasme riche en régions de bases AT.
2. Technologie PCR
Les amorces spécifiques sont conçues selon les séquences conservées dans le génome de Mycoplasma, l'acide nucléique de l'échantillon à tester est amplifié, et le diagnostic est fait en analysant la taille du produit amplifié. La technologie de détection PCR est utilisée pour la détection de la contamination par les mycoplasmes, avec un cycle court, une sensibilité élevée, une bonne spécificité, une opération simple et peut détecter un grand nombre d'échantillons à la fois.
3. Le dosage immuno-enzymatique (ELISA)
ELISA est utilisé dans la détection de la contamination par les mycoplasmes, avec une bonne spécificité et sensibilité, et peut compléter la détection d'un grand nombre d'échantillons à la fois. Il a les caractéristiques d'une détection qualitative simple, rapide et quantitative.
4. Microscope électronique
Généralement, les cellules des usines cellulaires sont cultivées pendant 48 à 72 heures. Avant que les cellules ne soient presque confluentes, les cellules sont digérées avec de la trypsine pour fabriquer une suspension cellulaire, fixées, incorporées et tranchées avant l'observation. À l'heure actuelle, il existe plus de 20 types de mycoplasmes connus pour contaminer les cellules, dont plus de 95 % sont des mycoplasmes oraux. Les opérateurs doivent donc faire attention au fonctionnement aseptique lors de la culture des cellules.
The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.