Application de la plaque de culture cellulaire dans la détection MTT

Thu May 19 09:11:33 CST 2022

La plaque de culture cellulaireest une sorte d'outil biologique. Il est divisé en fond plat et fond rond selon la forme. Le nombre de puits comprend 6 puits, 12 puits, 24 puits, 48 ​​​​puits, 96 puits, 384 puits, etc. Il est principalement utilisé pour la culture cellulaire et peut également être utilisé pour mesurer concentration de protéines, les plaques à 96 puits sont couramment utilisées pour la détection MTT.

La méthode MTT, également connue sous le nom de méthode colorimétrique MTT, est une méthode de détection de la survie et de la croissance des cellules. Le principe de détection est que la succinate déshydrogénase dans les mitochondries des cellules vivantes peut réduire le MTT exogène en formazan cristallin bleu-violet insoluble dans l'eau (Formazan) et le déposer dans les cellules, tandis que les cellules mortes n'ont pas une telle fonction. Le diméthylsulfoxyde (DMSO) peut dissoudre le formazan dans les cellules, et sa valeur d'absorption de la lumière est mesurée à 570 nm avec un immunodosage enzymatique, qui peut refléter indirectement le nombre de cellules vivantes. Dans une certaine plage de nombres de cellules, la quantité de formation de cristaux de MTT est proportionnelle au nombre de cellules. Les étapes de détection sont les suivantes :

1. Culturez les cellules dans un Plaque de culture cellulaire à 96 puits. Une fois que la densité cellulaire est appropriée, ajouter 50 ul de MTT dans chaque puits et poursuivre la culture pendant 4 heures ;

2. Aspirez le milieu de culture contenant du MTT et ajoutez 150ul de DMSO. Vibrez horizontalement pendant 10 minutes pour dissoudre complètement les cristaux. Pour les cellules en suspension, après centrifugation, aspirer le milieu, puis ajouter du DMSO pour dissoudre ;

3. Mesurer l'absorbance à 550 nm sur l'instrument d'immunodosage enzymatique (définir un groupe témoin raisonnable et un groupe blanc) ;

4. Taux de survie cellulaire = valeur d'absorbance du groupe expérimental/valeur d'absorbance du groupe contrôle*100%.

Il faut noter lors de l'opération que le MTT est cancérigène. Si possible, essayez de porter des gants genre film transparent. Le MTT préparé doit être stérile. Le MTT est très sensible aux bactéries. Peu importe si vous ajoutez à la plaque de culture cellulaire 96 puits sans la protéger de la lumière. , Après tout, le temps est court, ou vous pouvez éteindre l'éclairage de la console.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.