Détection de l'activité des cellules dans les usines cellulaires - méthode MTT

Thu May 19 09:11:03 CST 2022

Le cell factory est un consommable souvent utilisé pour la culture cellulaire adhérente. Au cours de l'expérience, nous devons saisir l'état de croissance des cellules en temps réel et faire les ajustements pertinents en fonction de la situation spécifique. La viabilité cellulaire peut être détectée par la méthode MTT pour déterminer la croissance cellulaire. La méthode

MTT, également connue sous le nom de méthode colorimétrique MTT, est une méthode de détection de la survie et de la croissance des cellules. Le principe de détection est que la succinate déshydrogénase dans les mitochondries des cellules vivantes peut réduire le MTT exogène en formazan cristallin bleu-violet insoluble dans l'eau et se déposer dans les cellules, tandis que les cellules mortes n'ont pas une telle fonction. Le diméthylsulfoxyde (DMSO) peut dissoudre le formazan dans les cellules, et sa valeur d'absorption de la lumière peut être mesurée par dosage immuno-enzymatique à une longueur d'onde de 570 nm, qui peut refléter indirectement le nombre de cellules vivantes. Dans une certaine plage de nombre de cellules, la quantité de formation de cristaux de MTT est proportionnelle au nombre de cellules. Cette méthode a été largement utilisée dans la détection d'activité de certains facteurs biologiquement actifs, le dépistage à grande échelle de médicaments anti-tumoraux, le test de cytotoxicité et le test de radiosensibilité tumorale. Il se caractérise par une sensibilité et une économie élevées.

Avant de tester la viabilité des cellules dans l'usine de cellules, une étape très importante est la formulation du MTT. Typiquement, la concentration de MTT dans cette méthode est de 5 mg/ml. Par conséquent, 0,5 g de MTT peut être pesé, dissous dans 100 ml de solution saline tamponnée au phosphate (PBS) ou de milieu sans rouge de phénol, filtré avec un filtre de 0,22 μm pour éliminer les bactéries dans la solution et stocké à 4 ° C dans l'obscurité. . . Pendant la préparation et le stockage, essayez d'envelopper le récipient avec du papier d'aluminium.

Lorsque vous utilisez la méthode MTT pour mesurer l'activité cellulaire dans l'usine de cellules, il convient de noter que le MTT est cancérigène, soyez donc prudent lorsque vous l'utilisez. Cette méthode ne peut être utilisée que pour détecter le nombre relatif de cellules et la viabilité relative, mais pas le nombre absolu de cellules. Lors du test des résultats avec un lecteur de microplaques, afin d'assurer la linéarité des résultats expérimentaux, l'absorbance MTT doit être dans la plage de 0 à 0,7 autant que possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.