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Subkultur bezieht sich auf den Prozess, bei dem die Kultur in kleine Teile geteilt wird, diese in ein anderes Kulturgefäß (Flasche) erneut inokuliert und dann kultiviert werden. Zellkulturflaschen sind häufig verwendete Verbrauchsmaterialien bei der Kultivierung von Zellen. Wie werden also die Zellen in der Flasche subkultiviert?
Im Allgemeinen wachsen die Zellen in den Zellkulturflaschen zu einer dichten Monoschicht heran und sind im Grunde gesättigt. Damit sich die Zellen weiter vermehren und die Zellzahl erweitern können, müssen Passagen durchgeführt werden. Suspendierte Zellen können direkt abgetrennt werden, während anhaftende Zellen verdaut werden müssen, bevor sie abgetrennt werden können. Im Allgemeinen werden proteolytische Enzyme (wie Trypsin) verwendet, um adhärente Zellen in einzelne Zellen zu verdauen. Zur Verbesserung der Verdauung kann auch Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA) zugesetzt werden. Beobachten Sie die Zellen, bis die Zellen rund werden und sich von der Flaschenwand lösen. Dieser Vorgang dauert oft 5-15 Minuten. Um Zellklumpen zu vermeiden, klopfen Sie während des Aufschlusses der Zellen nicht auf die Zellkulturflaschen.
Für besonders schwer verdauliche Zellen können Sie Trypsin-EDTA-Aufschlusslösung zugeben und die Zellen bei 37°C lagern erleichtern die Verdauung. Nachdem sich die Zellen von der Flaschenwand gelöst haben, fügen Sie sofort ein komplettes Medium hinzu, das Serum enthält, um den Verdau zu stoppen. Bestimmte Proteine im Serum können die Bauchspeicheldrüse hemmen. Enzymaktivität. Im Allgemeinen ist eine Zentrifugation nicht erforderlich. Wenn die Zellen serumfreies oder serumarmes Medium benötigen, zentrifugieren Sie bei 125000 g für 5 Minuten, verwerfen Sie dann das eingestellte Medium, fügen Sie geeignetes neues Medium hinzu und mischen Sie die Zellen vor der Subkultivierung vorsichtig.
Das Zellpassageverhältnis beträgt im Allgemeinen 1:2 -1:20, je nach Zelltyp. Bei der Passage schädigt Trypsin die Zellmembran einiger Zellen. Sie können einen Zellschaber verwenden, um die Zellen vorsichtig abzukratzen, eine angemessene Menge Medium hinzufügen, vorsichtig pipettieren, um die Zellen zu mischen, und sie in eine neue Kulturflasche überführen.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.