Aktivitätsnachweis von Zellen in Zellfabriken - MTT-Verfahren

Thu May 19 09:26:30 CST 2022

Das Zellfabrik ist ein Verbrauchsmaterial, das häufig für adhärente Zellkulturen verwendet wird. Während des Experiments müssen wir den Wachstumszustand der Zellen in Echtzeit erfassen und entsprechende Anpassungen entsprechend der spezifischen Situation vornehmen. Die Lebensfähigkeit von Zellen kann durch die MTT-Methode nachgewiesen werden, um das Zellwachstum zu bestimmen.

MTT-Methode, auch bekannt als kolorimetrische MTT-Methode, ist eine Methode zum Nachweis von Zellüberleben und -wachstum. Das Nachweisprinzip besteht darin, dass Succinat-Dehydrogenase in den Mitochondrien lebender Zellen exogenes MTT zu wasserunlöslichem blauviolettem kristallinem Formazan reduzieren und sich in Zellen ablagern kann, während tote Zellen keine solche Funktion haben. Dimethylsulfoxid (DMSO) kann Formazan in Zellen auflösen, und sein Lichtabsorptionswert kann durch einen enzymgebundenen Immunadsorptionstest bei einer Wellenlänge von 570 nm gemessen werden, was indirekt die Anzahl lebender Zellen widerspiegeln kann. Innerhalb eines bestimmten Zellzahlbereichs ist die Menge der MTT-Kristallbildung proportional zur Zellzahl. Dieses Verfahren wurde weithin beim Aktivitätsnachweis einiger biologisch aktiver Faktoren, beim Anti-Tumor-Medikamenten-Screening im großen Maßstab, bei Zytotoxizitätstests und Tumorstrahlenempfindlichkeitstests verwendet. Es zeichnet sich durch hohe Empfindlichkeit und Wirtschaftlichkeit aus.

Bevor die Lebensfähigkeit von Zellen in der Zellfabrik getestet wird, ist die Formulierung von MTT ein sehr wichtiger Schritt. Typischerweise beträgt die MTT-Konzentration bei diesem Verfahren 5 mg/ml. Daher können 0,5 g MTT abgewogen, in 100 ml phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) oder phenolrotfreiem Medium gelöst, mit einem 0,22-μm-Filter filtriert werden, um Bakterien in der Lösung zu entfernen, und bei 4 °C im Dunkeln gelagert werden . . Versuchen Sie bei der Zubereitung und Lagerung, den Behälter mit Alufolie zu umwickeln.

Bei der Verwendung der MTT-Methode zur Messung der Zellaktivität in der Zellfabrik ist zu beachten, dass MTT krebserregend ist, also seien Sie vorsichtig bei der Anwendung. Diese Methode kann nur zum Nachweis der relativen Zellzahl und der relativen Lebensfähigkeit, nicht aber der absoluten Zellzahl verwendet werden. Beim Testen der Ergebnisse mit einem Mikroplatten-Lesegerät sollte die MTT-Extinktion so weit wie möglich im Bereich von 0–0,7 liegen, um die Linearität der experimentellen Ergebnisse sicherzustellen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.