English
Матэрыялы і метады
3.1. Культывацыі ў фляжцы Shake
Папярэднія культуры клетак завісі MDCK.SUS2 вырошчвалі ў shaker flasks (125 мл полікарбанатных колбах Эрленмейера, № 431143, Corning®, Нью-Ёрк, Нью-Ёрк, ЗША) з працоўным аб'ёмам 50 мл (wv) , у інкубатары Multitron Pro (Infors HT, Bottmingen, Швейцарыя) пры тэмпературы 37 °C і атмасферы CO2 5% з частатой устрэсвання 180 абаротаў у хвіліну. Клеткі пасавалі кожныя 3-4 дні з шчыльнасцю пасеву 0,5-0,8 × 106 клетак/мл.
IAV A/Puerto Rico/8/34 (H1N1). у адгезійных клетках MDCK (ECACC № 84121903). Вірус насення меў тытр 1,1 × 109 TCID50/мл.
Клеткі культывавалі ў хімічна вызначанай асяроддзі без бялку і жывёльнага кампанента, Smif8 (Smif8 PGD 2×, дапоўненая 5 мм глютамінам, і 8 mM pyruvate), спецыяльна распрацаваны для культывавання завісі клетак MDCK [95].
Эксперыменты па росту і інфекцыі для праверкі мадэлі праводзіліся з выкарыстаннем 500 мл устрэсваючых колб (№ 4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, ЗША) з пачатковым аб'ёмам культывавання 200 мл пры 150 абаротаў у хвіліну. Былі выкананы два культывавання, адна імітацыйная інфекцыя (вырошчванне 1), дзе клеткі раслі каля 200 гадзін, і адна інфекцыя (вырошчванне 2), дзе клеткі былі заражаныя IAV прыкладна праз 49 гадзін пасля інакуляцыі. Для дасягнення сінхроннага заражэння клетачнай папуляцыі быў выкарыстаны moi = 10. З-за адносна нізкай канцэнтрацыі клетак у момант заражэння (2,1 × 106 клетак/мл) і высокага moi выкарыстанага, ні замена асяроддзя, ні даданне трыпсінаў (для актывацыі віруса) не было неабходным. У абодвух культывацыях стэрыльную ваду Milli-Q дадалі перад адборам пробы для кампенсацыі выпарэння вады (1-2 мл/сут), паколькі эксперымент праводзіўся ў негидратированном інкубатары.
Крыніца з: https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.