Як вымераць колькасць жывых клетак на клетачнай фабрыцы

Wed May 18 14:38:36 CST 2022

— аднаслаёвая або шматслаёвая структура расходных матэрыялаў для культуры клетак. Падчас працэсу культуры клетак нам трэба своечасова зразумець стан росту клетак, перш чым перайсці да наступнага кроку. Колькасць жыццяздольных клетак можна вызначыць пры афарбоўцы трыпанавым сінім. Спецыфічны метад працы наступны:1. Для адгезійных клетак адсмоктваюць асяроддзе, дадаюць раствор для пераварвання і пераварваюць у інкубатары на працягу адпаведнага часу. Пасля таго, як клеткі сталі круглымі, пераварванне спынялі даданнем роўнага або большага аб'ёму асяроддзя, чым аб'ём пераваранай ежы. Пасля цэнтрыфугавання клетачную завісь робяць з культурай;cell factory

2. Вазьміце 0,5 мл раствора трипанового сіняга, 0,3 мл PBS і 0,2 мл завісі клетак і добра змяшайце. Затым сумесь пакідаюць на 1-2 хвіліны. Выкарыстоўвайце капілярную піпетку або маленькі наканечнік піпеткі на 10 мкл, каб набраць невялікую колькасць сумесі і ўвесці яе ў гемоцитометр;

3. Падлічыце не менш за 1000 клетак і падлічыце колькасць афарбаваных клетак;

4. Прамыйце падліковую пласціну і покрыўнае шкло звышчыстай вадой і 75% этанолу;

5. Нармальныя клеткі не будуць афарбоўвацца, толькі пасля таго, як клеткі адміраюць, пранікальнасць клеткавай мембраны становіцца больш, трыпанавы сіні пранікае ў клеткі, і клеткі здаюцца блакітнымі. Сумесь не варта трымаць занадта доўга, інакш нармальныя жывыя клеткі таксама паглынуць фарбавальнік, што паўплывае на дакладнасць падліку;

6. Жыццяздольнасць клетак (%) = (агульная колькасць клетак - колькасць афарбаваных клетак)/агульная колькасць клетак*100;

7. Як і метад падліку клетак, афарбоўка трыпанавым сінім мае вялікую хібнасць. Ён можа выявіць толькі ранні ўзровень апоптоза і не можа паказаць розніцу паміж кантрольнай групай і эксперыментальнай.

У працэсе культывавання клетак на клетачнай фабрыцы заўсёды ёсць некаторыя клеткі, якія гінуць па розных прычынах. Авалоданне колькасцю жывых клетак і жыццяздольнасцю клетак з'яўляецца ключавой аперацыяй у эксперыментах з культурай клетак і эфектыўным спосабам забеспячэння ходу эксперыменту.

In the process of culturing cells in a cell factory, there are always some cells that die due to various reasons. Mastering the number of living cells and cell viability is a key operation in cell culture experiments and an effective way to ensure the progress of the experiment.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.