Выяўленне актыўнасці клетак на клеткавых фабрыках - метад МТТ

Wed May 18 14:36:41 CST 2022

- гэта расходны матэрыял, які часта выкарыстоўваецца для культуры клетак. Падчас эксперыменту нам трэба зразумець стан росту клетак у рэжыме рэальнага часу і ўнесці адпаведныя карэктывы ў адпаведнасці з канкрэтнай сітуацыяй. Жыццяздольнасць клетак можа быць выяўлена метадам МТТ для вызначэння росту клетак.MTT метад, таксама вядомы як каларыметрычны метад МТТ, з'яўляецца метадам выяўлення выжывання і росту клетак. Прынцып выяўлення заключаецца ў тым, што сукцинатдегидрогеназа ў мітахондрыях жывых клетак можа аднаўляць экзагенны МТТ да нерастваральнага сіне-фіялетавага крышталічнага формазана і адкладаць у клетках, у той час як мёртвыя клеткі такой функцыі не выконваюць. Дыметилсульфоксид (ДМСО) можа раствараць формазан ў клетках, і яго значэнне паглынання святла можна вымераць з дапамогай імунаферментнага аналізу пры даўжыні хвалі 570 нм, які можа ўскосна адлюстроўваць колькасць жывых клетак. У пэўным дыяпазоне колькасці ячэек колькасць крышталяў МТТ прапарцыйна колькасці клетак. Гэты метад шырока выкарыстоўваецца пры выяўленні актыўнасці некаторых біялагічна актыўных фактараў, маштабным скрынінгу супрацьпухлінных прэпаратаў, тэсту на цытатоксічнасць і радыёадчувальнасці пухліны. Ён характарызуецца высокай адчувальнасцю і эканамічнасцю.cell factory

Перад тэставаннем жыццяздольнасці клетак на клетачнай фабрыцы вельмі важным этапам з'яўляецца распрацоўка МТТ. Звычайна канцэнтрацыя МТТ пры гэтым метадзе складае 5 мг/мл. Такім чынам, 0,5 г МТТ можна ўзважыць, растварыць у 100 мл фізіялагічнага раствора з фасфатным буферам (PBS) або асяроддзя без фенолу, адфільтраваць з дапамогай фільтра 0,22 мкм для выдалення бактэрый у растворы і захоўваць у цемры пры тэмпературы 4°C. . . Падчас падрыхтоўкі і захоўвання паспрабуйце абгарнуць ёмістасць алюмініевай фальгой.

Карыстаючыся метадам МТТ для вымярэння актыўнасці клетак на клетачнай фабрыцы, варта адзначыць, што МТТ з'яўляецца канцэрагенным, таму будзьце асцярожныя пры яго выкарыстанні. Гэты метад можа быць выкарыстаны толькі для выяўлення адноснага колькасці клетак і адноснай жыццяздольнасці, але не абсалютнага колькасці клетак. Пры праверцы вынікаў з дапамогай рыдэра для микропланшетов, каб гарантаваць лінейнасць вынікаў эксперыменту, паглынанне МТТ павінна быць максімальна ў межах 0-0,7.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.